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检测原理：JTC蛋白质A ELISA试剂盒是基于样本处理后的夹心固体相ELISA原理的两步免疫测定系统。在1步中，含有蛋白质A的样本被稀释在试剂盒中提供的样本稀释液中（如有必要）。然后加入变性缓冲液并混合，以使蛋白质A与抗体分离。夹心固相ELISA利用抗-蛋白质A的多克隆抗体进行固相固定（在孔板上），并使用抗-蛋白质A的多克隆抗体作为抗体-酶（辣根过氧化物酶）偶联溶液。在第二步中，处理（变性）后的样本和标准品与测定缓冲液混合，并允许与固相抗体反应。孵化和洗涤后，将添加酶偶联物，从而在固相和偶联抗体之间形成蛋白质A的夹心。第二次洗涤步骤后，加入3,3＇,5,5＇-四甲基苯二胺（TMB）的溶液并孵化15分钟，产生蓝色。加入停止溶液后，颜色开发被停止，并且颜色变为黄色并在450 nm处通过分光光度法测量。使用4参数logistic（4-PL）拟合标准曲线来计算样本中的蛋白质A的浓度。蛋白质A的浓度与测试样本的颜色强度与标准品的比较成正比。

试剂盒组分：

1.样品处理板（STP，1×V型96孔板）

2.样品稀释液（1瓶，25毫升），含有低浓度洗涤剂和防腐剂的无蛋白质基质

3.变性缓冲液（1瓶，12毫升），含有防腐剂的无蛋白质基质（低pH）

4.抗体涂覆孔（1×96孔ELISA板），微滴定孔涂有多克隆抗蛋白质A抗体

5.测定缓冲液（1瓶，6毫升），含有蛋白质基质和防腐剂，蓝色

6.标准品套件（1毫升/瓶），含有0、0.16、0.31、0.63、1.25、2.5、5和10 ng/mL

的蛋白质A

7.酶偶联物（1瓶，12毫升），多克隆抗蛋白质A抗体标记的HRP缓冲液

8.显色底物试剂（1瓶，12毫升），由苯二胺和过氧化氢组成

9.洗涤液（1瓶，50毫升），含有0.05％Tween 20作为洗涤剂的PO4缓冲盐水溶

液，浓缩的（20倍）

10.终止溶液（1瓶，12毫升），1摩尔的盐酸溶液

11.纸板封口器（2个）

12.说明书条形码

需自备物品

1. 配有450 nm滤镜的酶标仪（如果可能，630 nm作为参考滤镜）

2.低转速为200 rpm的轨道旋转器

3.精密移液器：100微升

4. 一次性移液管尖

5.蒸馏水

6.吸水纸

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