产品介绍
产品简介
腺病毒是一种线性双链DNA病毒,由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,重组腺病毒已越来越广泛地被应用于基础研究和临床试验中,并成为世界上最常用的基因治疗载体之一。
博恒生物重组腺病毒系统是将携带外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染包装细胞,借助Cre/loxP系统的作用重组产生腺病毒。该系统既克服了传统共转染系统重组效率低的缺点,也避免了细菌重组中的种种不确定性,实现了快速高效的腺病毒包装。
博恒生物提供的重组腺病毒为复制缺陷型病毒,即病毒感染目的细胞后不会再感染其他细胞,也不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒,安全性能良好。
技术特点
· 复制缺陷型腺病毒颗粒,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用;
· 无需任何转染试剂,操作简洁;
· 实验在手时间短;
· 适用于在难以转染的细胞中进行的RNA干扰、过表达特定基因或过表达特定microRNA研究和In vivo 实验
· 不适用于感染腺病毒以后细胞发生死亡和分化的敏感细胞和需要长期稳定表达目的基因的实验;
服务范围
1. 过表达腺病毒克隆构建和病毒包装;
2. 干扰腺腺病毒克隆构建和病毒包装;
3. lncRNA腺病毒克隆构建和病毒包装;
4. MicroRNA腺病毒克隆构建和病毒包装 ;
合作流程
1. 按照客户需求构建包含目的基因(或干扰序列)的穿梭质粒;
2. 包装质粒和穿梭质粒共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒颗粒;
3. 病毒原液扩增、纯化和滴度检测;
4. 实验报告提交和病毒发货。
优势分析
病毒表达系统 | 腺病毒表达系统 | 慢病毒表达系统 |
病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA逆转录病毒 |
自主复制 | 不能 | 不能 |
是否整合 | 病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因 | 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 |
感染细胞类型 | 感染绝大多数细胞,包括分裂期、非分裂期细胞。 | 感染绝大多数细胞,包括分裂期、非分裂期细胞。 |
表达丰度 | 高水平表达 | 中水平表达 |
表达时间 | 快(1-2 天) | 慢(2-4 天) |
滴度 | 滴度可达10E12pfu/mL | 滴度可达10E9-10E10TU/mL |
克隆容量 | 可插入高达8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低 | 可插入不超过8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低 |
免疫原性 | 高免疫原性 | 低免疫原性 |
RNAi | 病毒进入细胞往往引起细胞内干扰素反应,一般情况下不适合做RNAi实验 | 适合,是RNAi实验的优选工具 |
基因过表达 | 包装容量较大,可以满足较大基因的包装,是过表达基因的优选工具 | 包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响 |
过表达microRNA | 适合 | 适合,是过表达microRNA实验的优选工具 |
下调microRNA | 有报道但不成熟 | 有报道但不成熟 |
是否可以自行扩增 | 可以 | 需要特殊包装系统和包装环境 |