对HeLa细胞的胞浆及核组分进行蛋白免疫印迹分析,结果显示交叉污染极少。利用4-20% 梯度Tris-甘氨酸变性凝胶对总蛋白量(20μg)相等的四种样品进行电泳。将蛋白转移到醋酸纤维素膜上,用含有3%BSA的Tris缓冲液进行封闭。A. 用抗Oct-1的抗血清(1:400)进行结合,然后利用1:100,000的标记辣根过氧化物酶的二抗进行结合。B. 用抗hsp90的抗血清(1:400)进行结合,然后利用1:50,000的标记辣根过氧化物酶的二抗进行结合。两个分析所用的底物均为用于蛋白免疫印迹的SuperSignal皮克级化学发光底物(产品货号 34080)。
参考文献
Corless,M.,et al.(2006).J. Endocrinol.190,719-727.
Gomes, D.A.,et al.(2008). J. Biol. Chem.2834344-4351.
Lecanda, J.,et al.(2007).Cancer Res.67, 1007-1018.
Liu, O.,et al. (2007). FASEB J. 21,61-73.
Smirnova, I.V.,et al. (2000).J. Biol. Chem.275(13), 9377-9384.
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Yamada, N.A.et al. (2003).Mutagenesis18(3), 277-282.
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NE-PER 核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒
可抽提50个细胞沉淀样品,每个样品为体积为
20μl的细胞沉淀(共可抽提大约2g细胞沉淀)
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核蛋白抽提试剂(NER)
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NE-PER 核蛋白胞浆蛋白抽提试剂盒
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20μl的细胞沉淀(共可抽提大约10g细胞沉淀)
包括:胞浆蛋白抽提试剂I(CER I)
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核蛋白抽提试剂(NER)
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