产品内容:
1. microRNA mimics & inhibitors化学合成
产品名称
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规格
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纯化方式
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价格
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交货日期
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Mimics
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2OD
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HPLC
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350
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5-7个工作日
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Inhibitors
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2OD
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HPLC
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350
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5-7个工作日
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Mimics negative control
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1OD
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HPLC
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118
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现货
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Inhibitors negative control
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1OD
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HPLC
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118
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现货
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FAM Mimics NC
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1OD
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HPLC
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148
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现货
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注: 产品冻干粉,呈白色干粉。在DEPC水溶液中即可溶解,储存于-20℃。本规格按照一般实验需要的量。如大量合成,价格另议。
具体请参照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff808081217164040121941a02cb5793.htm
2. microRNA 过表达载体/质粒构建/荧光素酶报告载体构建
microRNA 过表达载体
真核生物MicroRNA的产生有三种形式。1)miRNA以长的pri-miRNA形式从基因组中转录出来;2)pri-miRNA被RNAaseIII内切酶或剪接体组分切割,形成大约60~70nt的pre-miRNA;3)pre-miRNA被运出细胞核,进而在Dicer样内切酶切割下,形成miRNA。
本公司的可免费提供的miRNA常用表达载体有:
载体名称 |
启动子 |
筛选基因 |
标记基因 |
pRNAi-U6.1/Neo |
U6 |
Neomycin |
GFP |
pRNAi-CMV3.2/Neo |
CMV |
Neomycin |
GFP |
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) |
CMV |
Neomycin |
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可免费提供的载体名称:
(1) 所得质粒已溶解在Buffer中,应放在-20℃冰箱保存
(2) 已转化质粒菌液应加50%甘油,-80℃冰箱保存
microRNA靶基因报告载体/ 荧光素酶报告载体构建
A. 优点:
MiRNA 荧光素酶报告载体具有以下优点:
· 功能性检测:是一种功能性的分析方法,用于监测细胞内miRNA介导的靶基因的调控
· 可定量分析: miRNAs介导的调控可以通过荧光素酶基因的表达进行定量监测
· 可构建稳定细胞系–载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系.
B. 原理:
pLuc-3UTR报告载体是一系列基于荧光素酶报告的构建体,用于监测miRNA介导的细胞内靶基因调控。每个载体含有CMV启动子、荧光素酶基因、3 ' UTR 靶基因和SV40终止子序列。MiRNA的表达并与3 ' UTR结合,导致荧光素酶基因表达的抑制。因此miRNA介导的特异靶的调控可通过荧光素酶活*进行监测。比较二个样本荧光素酶活性可解析调控,明确差异。
本公司的可免费提供的microRNA靶基因报告载体 有:
载体名称 |
启动子 |
标记基因 |
pGL4.17 |
CMV |
荧光素酶基因 |
pGL-Basic |
CMV |
荧光素酶基因 |
pGL3-Control |
CMV |
荧光素酶基因 |
pRL-TK |
CMV |
荧光素酶基因 |
详细请参考 http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b441ea5e20266.htm
3. microRNA 慢病毒载体
产品名称
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产品特点
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交货日期
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价格
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Pre-lenti-miRNA
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U6、GFP、neo筛选标记
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20个工作日
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2000
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Pre- lenti -miRNA NC
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U6、GFP、neo筛选标记
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15个工作日
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1000
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注: 所得质粒已溶解在Buffer中,应放在-20℃冰箱保存
已转化质粒菌液应加50%甘油,-80℃冰箱保存
microRNA 慢病毒包装系统具体讲参照:《ViraPowerTM Packaging Mix pLenti expression plasmid DNA》 (Invitrogen)
详细参照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811bb9b4a8011bc03d3396224d.htm
4. microRNA 实时荧光定量PCR检测
实时荧光定量PCR(Real Time PCR,qRT-PCR)避免了传统PCR 以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。与常规PCR 相比,实时荧光定量PCR 具有特异性更强、有效解决PCR 污染问题、自动化程度高等特点,已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA 表达量的变化;比较不同
组织的mRNA 表达差异;验证基因芯片,siRNA 干扰的实验结果。它涉及到DNA或RNA 样品制备,反转录及PCR 反应等一系列重要的分子生物学过程。
配套产品:qPCR实时荧光定量一步法试剂盒 BK2100BK BK2100 http://www.biomart.cn/infosupply/ff80808125d818cb0125d844868d01a3.htm
设计目的片段和内参基因的qPCR 引物:利用Primer5.0 等软件设计PCR 引物
及探针。我们公司免费为客户设计引物和探针。
详细参照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b44285bd50287.htm http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b44285bd50287.htm
5. microRNA 特异引物(部分产品有现货,具体见microRNA 产品说明)
microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核
生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育
和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern Blot 等基
于分子杂交的方法,这些方法敏感度低、耗时长、RNA 的用量较大。miRNA Q-PCR Detection
Kit 采用了国际上公认的核酸检测标准技术――Real-Time PCR 技术来对miRNA 进行检测,
其具有快速、特异性强、灵敏度高等优点。
EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set包含了miRNA特异的逆转录引物,以及qPCR正、
反向引物套装。其中茎凸环结构状的miRNA特异逆转录引物可特异性的转录成熟的miRNA。再利
用高度特异的正反向引物,使miRNA定量即灵敏又高度特异。EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set 提供了一种最低能检测到5 个拷贝目标miRNA 的高灵敏度的检测方法,并且具有一个7 个数量级
的动态变化范围,反应的模板可以是总RNA 或者已纯化的小RNA 等。
名称 |
介绍 |
量
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RT Primer |
miRNA Reverse Transcription Primer |
2 nmol
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Forward Primer |
miRNA Forward Primer |
2 nmol
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Reverse Primer |
miRNA Reverse Primer |
2 nmol
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DEPC-H2O |
DEPC-treated, DNase and RNase-free water |
1.5ml |
配套产品:miRNA 引物检测试剂盒 BK1010 4OO元
http://www.biomart.cn/infosupply/ff80808121587a8b01215b94717e0321