来宝网 2017/4/24点击2829次
DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶是指催化以DNA单链为模版，以4种脱氧核苷酸为底物，由5'端点开始复制到3'端，合成一条与模版链序列互补的DNA新链的酶。
常见的DNA聚合酶种类很多，如Taq、Pfu、KOD、Klenow、Phusion等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热DNA聚合酶如Taq、Pfu、KOD、Phusion等，常温DNA聚合酶包括Klenow、Bst、Phi29等。目前市面上以耐热DNA聚合酶为主。根据保真度来分，高保真DNA聚合酶如Pfu、KOD、Phusion等，普通DNA聚合酶如Taq等。
目前市面上耐热DNA聚合酶的种类也很多，到底该如何选择呢？主要从保真性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标来选择。
保真性概念：实际上是指DNA聚合过程中的错配率，错配率越低保真性越好。 高保真DNA聚合酶的保真原理是：高保真DNA聚合酶具有3'到5'核酸外切酶的活性，PCR扩增途中如果产生了错配的碱基，它可以将其切掉，从而保证了扩增的准确性。普通DNA聚合酶(如taq DNA聚合酶)的错配率在10-5碱基/循环数，而高保真DNA聚合酶错配率可降到10-6甚至10-7数量级，大大降低了出错的可能性；它适合对PCR保真性要求较高的实验，如基因筛选、测序、突变检测等。 高保真DNA聚合酶的3'到5'核酸外切酶活性会导致PCR反应之后不会加尾，为平末端，所以如果要进行TA克隆，要先进行PCR产物回收（否则影响加尾），然后回收产物用普通Taq酶72度保温一段时间，从而利用普通Taq酶加尾的活性。
必拓生物提供多种耐热DNA聚合酶，区别如下：
Taq DNA聚合酶
Taq DNA聚合酶是PCR中应用最广泛的酶。本公司生产的Taq DNA聚合酶是94 KDa的耐热性DNA聚合酶，是把Thermus aquaticus DNA Ploymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后分离提取得到的，它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。
产品特点
1.应用最广泛的耐热性DNA聚合酶；
2.产物3’端附有一个“A” 碱基，可直接克隆于T-Vector中；
3.无3'-5'外切酶活性，保真性低，如配套使用高保真Buffer(2 x Taq Premix)，不仅表现出较高的保真性，对于难以扩增的高GC含量模板，也能获得比较好的扩增效果。
KODsso7d高保真DNA聚合酶
KODsso7d高保真DNA聚合酶来自极端耐热古生菌Thermococcus kodakaraensis (KOD1)的DNA聚合酶，经重组融合了Sso7d序列，是一种新的高保真快速耐热DNA聚合酶。
产品特点
1.优良的耐热性；
2.极快的扩增速度，延伸速度2 kb/min；
3.高保真性，具有3'-5'核酸外切酶活性，比Taq DNA聚合酶准确性高50倍，对处理GC-rich模板等具有特异性高级结构的目的片段非常有利；
4.产物为平末端，可以直接克隆至平末端载体中。
ExFi Tfu DNA聚合酶
ExFi Tfu DNA聚合酶是一种高保真DNA聚合酶，是将来源于嗜热古菌Thermococcus sp. 4557 PolB基因克隆至表达载体，经大肠杆菌表达，多种介质纯化而成。主酶分子量为92 kDa。经过工程优化和质控测试，具有比Taq酶更快的延伸速度，达到30秒/kb。稳定性好，特异性强，适用于各种PCR扩增；
产品特点
1.优良的耐热性；
2.极快的扩增速度，延伸速度2 kb/min；
3.高保真性，具有3'-5'核酸外切酶活性，比Taq DNA聚合酶准确性高50倍；
4.产物为平末端，可以直接克隆至平末端载体中。
ExFi Tusion DNA聚合酶
ExFi Tusion DNA聚合酶是一种高度热稳定的DNA聚合酶，来源于嗜热菌Thermococcus sp.4557的PolB基因，通过单链DNA结合结构域融合及多个关键位点的基因进化，经大肠杆菌表达及多种介质纯化而得到。酶的分子量为106 kDa。具有比Taq酶、Pfu酶、Kod酶较快的扩增快速，较高的保真性，和较强稳定性的特点。
产品特点
1.稳定性、耐热性更好；
2.更快的扩增速度，延伸速度为3-4 kb/min；
3.可很好的扩增8 kb的DNA模板片段；
4.3'-5'核酸外切酶活性，更高保真性；
5.产物为平末端，可以直接克隆至平末端载体中。
欢迎索取小样试用装：热线400-961-8681！
