来宝网 2016/11/22点击1263次
无血清快速细胞冻存法与传统细胞冻存方法的比较如下：
| 传统细胞冻存方法 | 无血清快速细胞冻存法 | |
| 安全性 | 动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险高 | 无动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险 |
| 冻存细胞种类 | 适合含血清细胞冻存 | 适合各类细胞冻存，尤其是无血清培养细胞 |
| 无血清培养细胞生长状态 | 易改变易由悬浮状态回复贴壁状态 | 保持悬浮培养状态 |
| 批次差异 | 批次差异大 | 无批次差异 |
| 操作方法 | 较复杂 | 简单快捷 |
| 保存设备 | 要求高（液氮） | 要求低（低温冰箱） |
| 操作安全性 | 低（易发生冻伤和爆裂） | 高 |
| 微量冻存 | 细胞易死亡，存活率低 | 细胞存活率高 |
| 整板冻存 | 不可行 | 可行，且方便快捷 |
无血清快速细胞冻存法的优势：
1. 不含血清和动物来源的蛋白：
这有几方面的好处，一是降低了动物血清来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险，确保冻存细胞的安全。二是对于已经适应了无血清培养的细胞来说避免了血清的带入，同时避免了细胞生长状态的改变（如悬浮培养细胞回复贴壁状态），对于细胞培养者来说，避免了细胞复苏时再次进行无血清驯化工作，减少了人力和时间的浪费。三是动物血清成分复杂，个体差异大，且生产来源不稳定，因此批次间质量常常不稳定，这导致培养细胞的状态也会受到影响，因此，无血清培养和冻存已经成为发展趋势。无血清冻存液成分和配比明确，批次间差异很小，能够保证生长细胞状态的稳定性，细胞存活率高。
2. 即用型：
传统冻存方法需要用培养细胞相应的新鲜培养基，所以要根据细胞不同选择相应的培养基加保护剂，即需要现用现配，这就增加了工作量；而无血清快速冻存液已包含细胞冻存所需的所有成分，是即用型，方便快捷。
3. 操作安全简便：
传统方法冻存细胞需要进行梯度降温过程，耗时长，且需要保存于液氮中长期保存，这就增加了成本和工作人员的工作量，且从液氮中取细胞也不方便，容易冻伤，有一定危险性。液氮缺少容易造成细胞死亡。而无血清冻存液冻存细胞只需要-70～-80℃冰箱即可长期保存，冻存和复苏操作都很安全简单。
4. 对冻存设备要求低：
传统冻存方法因为要保存于液氮中，对冻存管材质及密闭性要求高，若有冻裂或液氮渗漏极容易出现爆裂，极容易造成重要细胞株的丢失和操作人员受伤；而无血清快速冻存对冻存管的要求低，可用普通材质的螺口管即可，安全可靠。
5. 整板冻存：
对于用细胞培养板培养的细胞，例如杂交瘤筛选过程，如果想要暂时保存整板克隆，用传统方法非常麻烦，且由于细胞数量少，操作过程会对细胞造成机械损伤，因此在复苏时细胞成活率很低；而用快速冻存液就可解决这个问题，只需直接丢弃整板培养液，加入适量快速冻存液，封闭培养板边缘，再置于-80℃冰箱即可，复苏时直接将培养板置37℃培养箱解冻后换新鲜培养基即可恢复培养，细胞状态几乎不受影响。适用于各种型号细胞培养板（如96孔、48孔、6孔、平皿等）。
