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细菌内毒素检查（鲎试验）取代热原检查是必然的趋势，应用鲎试验检查内毒素要比热原检查法更适应现代制药工业的发展。目前已有许多国家在药典中规定了细菌内毒素检查的品种。在我国也是如此，从1995年到2000年，《中国药典》规定的内毒素检测品种数量大大增加，并在方法学上也从单纯定性检查到定性检查和定量检查同时并存。不仅是对药品的检查，而且在临床医学诊断中，内毒素的检查也不可忽视，因此，内毒素的检测方法日趋多样化。目前，细菌内毒素检测方法不少于20种，但得到FDA批准使用的方法仅有四种。

内毒素接触变形细胞后即可引起凝集反应，据此可以从鲎血变形细胞中提取其裂解物，制成鲎试剂。鲎试剂可测定患者血液中内毒素存在与否，可作为了解临床感染情况的一种检测方法。

鲎试剂与内毒素发生凝集反应的分子结构机制为：鲎血球的低渗抽取液中含有一种可凝固的蛋白（凝固蛋白原）及另一种高相对分子质量的凝固酶原。中国鲎凝固蛋白原的相对分子质量为16257（超速离心沉降平衡离心法测定为19300）的碱性单纯蛋白质，共由120个氨基酸组成。极微量的内毒素存在时，能激活凝固酶原使之变成凝固酶，并将凝固酶原上的Arg18-Thr19和Arg46-Glyz47切断，游离出28个氨基酸残基所形成的肽链C，使凝固蛋白原的残余部分（肽链A与肽链B）通过双硫键的联合转化生成凝固蛋白，形成凝胶（图37-1）。

基于上述原理，目前可用下述几种方法对内毒素进行检测。

1、试管凝胶肉眼判断法（简称试管法）

鲎试剂与被检样品混合后产生凝胶，将试管倾斜，用肉眼观察判断其凝结硬度，此法。简便，但容易产生主观因素，由于凝固点不易掌握，因此不能进行定量分析。

2、玻片微量呈色法（简称玻片法）

鲎试剂与被检样品在玻片上反应形成凝胶﹐观察其凝固后加上色素更能清楚鉴别。它的优点是微量，可节约鲎试剂10倍左右。

3、动态比浊法

动态比浊法即用光度计测定凝胶化过程中的浊度，此法的敏感度较高，但对照缺乏高度重复性。

4、荧光偏光法

现已不用于内毒素测定。

5、蛋白凝固法

蛋白凝固法即用中性缓冲液将凝胶洗净后，将其不溶性蛋白用Lowry法定量。此法在定量方面敏感度﹑精确度良好，但在血浆样品的检测时干扰作用问题尚待解决。

6、合成基质显色法

合成基质显色法系近年来开始应用的新方法，它是以一种合成肽氨基酸为基质，这种基质在分子结构上类似凝固蛋白原中的一段多肽分子（Val-Leu-Gly-Arg），并在此多肽链上结合上一个对硝基苯胺（paranitroaniline，PNA），根据其显色程度可直接测定凝固酶活性（因为凝固酶的激活强弱是根据内毒素的浓度而定）。合成基质显色法的敏感度为试管法的10倍，能精确定量，且鲎试剂用量较少，因此本法为目前最为优越的检测方法。