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全自动生化分析仪某些项目的检测

来宝网 2012/6/14点击3976次

大多数实验室都采用二甲苯胺蓝比色法检测血清镁离子的浓度。其具体原理为在碱性条件下,镁离子与二甲苯胺蓝形成蓝色复合物,于500nm波长处有吸收峰,根据一定范围内吸光度计算镁离子的浓度。本实验室近期镁离子测定中,空白值明显偏高,质控及标本都显示高值或大于最大测定范围,甚至低值质控测定值高于高值质控测定值。根据这一情况,本实验室设定一系列试验以去除镁离子测定的干扰。
1  材料与方法
1.1 仪器  TOSHIBA Accute TBA-40FR全自动生化分析仪
1.2 试剂  广州万孚生物技术有限公司提供的镁离子检测试剂盒,采用二甲苯胺蓝比色法测定镁离子浓度。
1.3 方法  由于本实验室拥有另一台型号为TBA-40FR的全自动生化分析仪,其参数设置与出现问题的型号仪器基本一致。在这一型号仪器同样条件下检测镁离子,发现质控及标本结果均正常,初步排除由试剂引起的问题。也有文章报道,搅拌器或各加样针附着物逐渐增多,结果携带污染物严重,也会影响检验结果。笔者进行常规清洁保养,并通过设置污染对、调换项目测试顺序、镁离子测定前碱液冲洗、更换波长、清洗反应杯等方法,问题始终没解决。因此,设定以下一系列试验查找对策。
1.3.1 检查光路系统,通过仪器参数观察到灯泡能量并未衰减,其他波长的测试项目也未出现问题,开放的光路部分用无水酒精清洗过。重新定标、质控、标本测试、空白吸光测定值仍维持在0.6205左右,而正常值为0.300~0.400,问题仍未解决。
1.3.2 考虑各试剂中诸多成分对镁离子测定都干扰,笔者对冲洗系统进行了检查,确定每根注水、吸水针都正常工作;并更换新的干燥棒;在管子每个接口处涂上胶粘剂,防止不明确漏气。再定标、检测,问题仍然重复。
1.3.3 考虑到试剂针冲洗的彻底性,将试剂针、样品针拆下、通畅,并确定试剂针供水顺畅,结果仍不理想。
1.3.4 将供应试剂针冲洗用水去离子水替换为5%次氯酸钠溶液,冲洗、浸泡管道,反复2~3次,共用时间约1h,再用去离子水来回冲洗干净。空白值降回0.400左右,质控高低值均在控,标本值也可正常测定,再按日常标本混合测试,结果比较理想。第2d再按上法冲洗几次,至今,结果均回复正常分布。
2  结果
经过对试剂针处次氯酸钠处理后,重新校准,测定省临检中心提供的质控水平1、2,结果均在控,前后具体测定情况如表1所示,污染问题已得到解决。表1  次氯酸钠处理前后吸光度变化以及质控、标本测定比较
A(空白)A(校准)V(高值质控)V(低值质控)标本测定次氯酸钠溶液处理前0.62850.7177>2.5001.528>2.500或混乱次氯酸钠溶液处理后0.45230.67441.485(在控)0.544(在控)正态分布
3  讨论
用全自动生化仪检测过程中,经常会遇到一些项目偶尔偏低或偏高的现象,如镁离子的测定,常会受甘油三脂、肌酸激酶试剂的影响,因为这两种试剂都部分的含有镁成分。因此,除了设置好交叉污染对,增加可疑项目之间的冲洗次数之外,仪器的各部件、管道的维护也很重要。在这次镁离子测定中,由于空白吸光度过高,笔者也考虑到可能反应杯磨损或污垢沉积的影响,也参照某些方法用5%次氯酸钠短时间浸泡反应杯,但效果不理想。最后,笔者考虑到试剂针虽然冲水通畅,但也可能冲洗不彻底,而且还有可能由于长期日积月累,试剂垢在针内壁的沉积,以及试剂针冲洗管道也可能存在某些不确定的污染。而且镁离子测定的条件是强碱(PH=11.30),试剂颜色深,更易受影响。所以,笔者只有用5%次氯酸钠反复冲洗后,问题才得以解决。但毕竟次氯酸钠具有强腐蚀性,只能短时间冲洗,以免影响到仪器管道、部件,而且一定要用去离子水冲洗干净。
 


 

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