来宝网 2011/11/28点击2778次
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线粒体分选试剂盒
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试剂盒的实验流程是基于温和MACS 技术,分离出的线粒体集完整性、高产量、高纯度优点于一体。
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分离线粒体完整性好: 分离线粒体纯度高: |
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整个过程如图:
1.裂解细胞。 2.用Anti-TOM22磁珠来标记线粒体外膜转位酶22(TOM22) 3.将标记的细胞裂解液上样到MACS柱中,MACS柱置于MACS分选器中。 洗涤杂质,洗涤过程中磁性标记的线粒体保留在柱中。 4.将柱从分选器中移走,洗脱线粒体。于是就得到了高纯、完整的线粒体。 |
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数据显示: A.MACS线粒体方法可靠。B.回收率和DC,UC相比最高。 C.分选纯度好。D.其他细胞器污染少。 E.分选后的线粒体功能性良好 |
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如何富集和检测分泌IL-17的活T细胞
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IL-17分泌分析的原理
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分析的起始材料为全血、外周血单核细胞(PBMC)或其他包含单层细胞的白细胞。T细胞以多克隆刺激物短暂刺激后,细胞被Catch Reagent—双特异性的抗体(CD45/IL-17)所标记。在37℃再培养细胞45分钟,使得IL-17分泌。分泌出来的IL-17则被细胞表面的双特异性的抗体所结合。然后,加入抗IL-17的荧光抗体,分泌IL -17的细胞就可以被流式细胞仪检测出来。再加入抗荧光抗体的微珠,即可进行分选。磁性标记的细胞保留在MACS柱中,而未标记的细胞则被洗脱。将柱子移出磁场,分泌IL-17的细胞则洗脱成为阳性选择的细胞组分。这些细胞现在可用于培养或分析。 |
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应用: *检测并富集分泌IL-17的活T细胞,用于表型鉴定、扩增和功能鉴定 *监测并分析抗原特异的T细胞免疫,如细菌和真菌免疫、自身免疫和其他炎症紊乱 *分离和扩增抗原特异的T细胞 *分析或克隆抗原特异T细胞的TCR库 |
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