来宝网 2011/10/8点击1507次
大家在工作中应经常总结，理论联系实际，重视文献的查询，不要匆匆忙忙地就进行试验，搞清楚原理，做好试验计划、设计好试验后，再有条不紊地进行。期间不要怕遇到问题，越是遇到问题，解决问题，提高得越快，如果长时间下来，都没有问题，都“一帆风顺”，那将会一直没有提高。这就是同样学历的大学生毕业几年后，水平差异很大的主要原因所在。建立一新药的质量标准时，可查阅其相关品种（结构式很像的），或其前几代品种的质量标准（USP、BP、JP等），一定会有所启发和帮助的。
HPLC仪器的介绍，基础知识。
l HPLC在各项分析技术中应用，及一些主要的技术要求、技术细节，着重讲解方法认证的各要素应如何理解和进行试验。并将举更多的实例，使大家对原理和应用有一个更深的认识和体会。
l 同时，还将讲述在新药申报和审评中，应注意的问题和事项，并就各剂型的注意事项逐一讲解。
l 有关物质的测定方法如何建立，和如何做到更科学、合理地制订一个产品的质量标准，和今后应如何去完善，修改。
l 我将还介绍以下Excel软件在我们分析工作中的应用。
l 演示一下HP-1100高效液相色谱仪软件的使用技巧
Ø 大家在工作中应经常总结，理论联系实际，重视文献的查询，不要匆匆忙忙地就进行试验，搞清楚原理，做好试验计划、设计好试验后，再有条不紊地进行。期间不要怕遇到问题，越是遇到问题，解决问题，提高得越快，如果长时间下来，都没有问题，都“一帆风顺”，那将会一直没有提高。这就是同样学历的大学生毕业几年后，水平差异很大的主要原因所在。建立一新药的质量标准时，可查阅其相关品种（结构式很像的），或其前几代品种的质量标准（USP、BP、JP等），一定会有所启发和帮助的。
Ø 工作的出发点也应一切以工作为主、以人为本！这一点是非常重要的，所有的工作都应该是有意义的，应把力气花在“刀刃”上。不要片面地追求数量，尽量把每一个工作把它做透、做明白，力争做到举一反三、融会贯通，这样遇到问题才能够解决。否则，将会事倍功半。大家应尽量多动脑筋，多思考，如何去提高工作效率，避免人力和物力的不必要浪费！
l HPLC仪的一般操作
1. 几大仪器生产厂商的介绍和使用下来的体会。
2. 流动相的配制 全部混合好后，泵抽滤、超声。不要用两个泵分别将流动相输入，即便是带了脱气机也不要这样操作，除非摸索试验条件。另应特别注意，抽滤所采用的膜。现市场上分别三种：用于水相、有机相，以及混用膜。最好采用混用膜，有一些厂家已发生将膜使用错，将泵堵塞的情况发生。抽滤后最好能再超声片刻。基线如波动过大，或出现毛刺基线时，基本上为气泡所至，再进行一遍抽滤和超声脱气。尤其是梯度洗脱时，更应注意气泡的产生。如有两个泵，最好集中使用一个泵，另一个以备用。
3. 柱子的安装 一般都有箭头指向，如无，按照文字方向。
4. 操作顺序 先冲洗外管路，再进柱子，流速应逐渐增加，观察流出情况和柱压。尤其是厂里质检科，这项工作是十分有意义的。
5. 平衡时间 一般大流速，1小时即可，测斜率，不看视野，定一常规数值；如有十二烷基硫酸钠等表面活性剂，可采用小流速冲过夜，第二天再加大流速1~2小时即可，否则保留时间将一直变化。
6. 如有气泡，无法实验，不要慌张，可将泵头上的旋扭拧下进行处理（详细讲解）。
7. 仪器维修 最好单位里能培养一位对仪器兴趣的同志，小毛病可自己修理，免去许多维修费，同时可马上解决问题。
（1）分析生化样品或血液制品时，最好加一预柱，还有用手性色谱柱时，也最好加一预柱以保护价格昂贵的手性色谱柱。
（2）最好能配一柱温箱，以保证试验的重现性和降低柱压以及清洗色谱柱时容易清洗干净。
（3）最好能配一电脑，国产软件4000~5000即可。数据便于处理，储存。
（4）压力不稳时，绝大多数情况是有气泡混入。应排除。
（5）试验后色谱柱冲洗。一般采用10%~20%的甲醇水溶液冲洗10~20个柱体积即可，即流速为1.0ml/min，冲洗40左右即可。冲洗柱子 实验结束后，如有盐，先采用纯水冲洗15~20分钟（流速1.0ml/min），如有十二烷基硫酸钠等表面活性剂，可时间再长一些；然后用20%甲醇冲洗10~20个柱体积，1.0ml/min流速，1小时即可，不可冲洗时间过长，相反会损伤柱子，且不要用纯水长时间冲洗。
（6）色谱柱不用、存放时，两头柱塞一定塞住，否则容易挥发干损伤柱子。
（7）建立仪器使用登记本，把每次仪器测定地样品名、流动相、柱压、柱温等参数记录下来，由于测定
