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一、溶剂配制
1、1mol/L（TEA）乙腈溶液：139μl TEA 乙腈 1ml
2、0.1mol/L（PITC）乙腈溶液：12μl PITC 乙腈 1ml
3、0.1mol/L HCl 溶液的配制：0.9ml HCl 水 100ml

二、样品溶液的衍生
分别取对照品和0.1mol/L HCl溶液各200μl，分置于一1ml离心管中，加0.1mol/L异硫氰酸苯酯（PIT C）乙腈溶液100μl，1mol/L三乙胺（TEA）100μl，混匀，室温放置1小时，加400μl正己烷萃取，静置10分钟，取下层溶液，0.45μm滤膜过滤，作进样液。

三、色谱条件
波 长：λ=254nm
柱 温：40℃
进样量：1μl
流动相：
A：  B：
按如下程序梯度洗脱：

四、梯度曲线图

五、17种氨基酸标液图谱

     按出峰顺序依次为：Asp； Glu； Ser； Gly； His； Arg； Thr； Ala；Pro；Tyr； Val； Met； Cys-Cys； Ile； Leu； Phe； Lys；
    正亮氨酸( Nle)在Leu和Phe之间；色氨酸(Trp)在Phe和Lys之间；40min处是衍生过程中产生的杂峰；46min处为衍生剂（异硫氰酸苯酯）峰。