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原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法

来宝网 2011/4/11点击1171次

用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂,强阳离子交换色谱柱分离,高效液相色谱-紫外检测器/二极管阵列检测器检测,外标法定量。

  该检测方法基本操作步骤如下:

  称取混合均匀的15 g原料乳样品(准确至0.01 g),置于50 mL具塞刻度试管中,加入30 mL乙腈,剧烈振荡6 min,加水定容至满刻度,充分混匀后静置3 min,用一次性注射器吸取上清液用针式过滤器过滤后,作为高效液相色谱分析用试样。

  分析图谱如下:

 

  HPLC测定方法

  色谱柱:强阳离子交换色谱柱,

  CNWSIL SCX,250 mm × 4.6 mm(i.d.),5 μm

  流动相:磷酸盐缓冲溶液-乙腈(70+30,体积比),混匀。

  流速:1.5 mL/min。

  柱温:室温。

  检测波长:240 nm。

  进样量:20 μL 乳与乳制品中动物水解蛋白检定-L(-)-羟脯氨酸含量测定法

  本方法适用于乳与乳制品中L(-)-羟脯氨酸含量的测定,通过对L(-)-羟脯氨酸含量的测定,可判定是否为动物水解蛋白。

  试样经酸水解,释放出羟脯氨酸。经氯胺T氧化,生成含有吡咯环的氧化物。用高氯酸破坏过量的氯胺T。羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物,在波长558nm 处进行比色测定。

 

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