来宝网 2011/4/2点击1528次
麸炒白术中白术内酯Ⅲ含量测定HPLC法
应用范围:测定确定麸炒白术中白术内酯Ⅲ含量
方法原理:白术饮片甲醇超声提取,经液相色谱分离,在220nm 处测定峰面积,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
仪器设备 STI500高效液相色谱仪(岛津),UV501紫外检测器,N3000色谱工作站。
色谱条件 VertexC18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)流动相:甲醇-乙腈-水(56:6:38);柱温25℃;流速1.0mL/min;检测波长220 nm。
试样制备:
对照品溶液的制备 对照品溶液的制备 精密称取白术内酯Ⅲ对照品适量,加甲醇溶解并稀释至0.03648mg/ml和0.04104mg/ml的对照品溶液。
供试品溶液的制备 将不同规格的白术饮片分别烘干后,粉碎,过80目筛,称取样品约0.5 g,置精密称定的磨口锥形瓶中,精密称重;准确加入甲醇25 mL,密塞,精密称重;超声提取30 min,放凉,精密称重,补足损失溶液量;摇匀后,过滤,弃去初滤液,取续滤液适量,即得。
操作步骤:
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件操作,按外标两点法计算白术内酯Ⅲ含量。