兔谷氨酸脱羧酶1(GAD1) ELISA 试剂盒 96T/48T

如何使用ELISA试剂盒
如：加样器不确，尤其10ul以下的加样器，对结果影响大、保温设备不良、洗涤用水不规范。如何解决这些问题呢，下面为您介绍以下几点使用方法：
1．在使用过程校正加样器；10ul以下加样器采用进口产品（芬兰、法国等）；
2．仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳；
3．必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。
4．认真阅读使用说明书。
5．样品加样
（1）加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。
（2）加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。
6．洗涤
（1）每次注水洗涤，应静止30秒钟；
（2）选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分；
（3）可选用塑料洗涤瓶。
7．加酶反应
（1）包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深；
（2）包括阳性对照在内，各孔均无显色；
（3）阳性对照不显色，而其它样本显色正常；
（4）有些标本显色不深，判断阳性困难。

特别说明:
#.一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.

ELISA试剂盒优点：
1、灵敏、特异的抗体；
2、重复性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；
6、价格优惠，限度的节省实验经费。

化学发光免疫分析试剂盒
1.在各孔中加入标准品或样品各100μL，37°C孵育90分钟
2.倒去孔内液体，拍干，加入100μL生物素化抗体工作液，37°C孵育 60分钟
3.洗涤3次
4.加入 100μL酶结合物工作液，37°C孵育 30分钟
5.洗涤5次
6.加入100μL 发光底物混合液，37°C孵育5分钟左右
7.立即测定各孔的化学发光值
8.结果计算




ELISA优化加样需要注意哪些
科研ELISA在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA 、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒加样的优化：在这一进程中，一般情况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上剧烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可获得。也可在板孔中参与稀释液，再在其参与血清标本，然后在微型颤动器上颤动1分钟以确保混和。

一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，跨过一星期测定的需低温冰存。
1、血清：用无菌管搜集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如出现堆积，应再次离心。
2、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
3、血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应该再次离心。
4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

注：
1.以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月。

2.如果样本种类在实验手册中没有提到，一般需要做预实验以确定试剂盒能被用来检测您的样品。

3.用于组织或细胞裂解的化学裂解液中的某些化学物质可能会影响ELISA实验结果。

4.由于其他来源的抗原可能和本公司试剂盒中使用的抗体不匹配（例如，抗体的目标，是构象表位而不是线性表位），其他一些制造商的非重组或重组蛋白可能无法被本公司试剂盒所识别。

5.由于包括细胞活力，细胞数量，以及采样时间等因素，从细胞培养上清液提取的样品，可能无法被检测。

6.建议采用新鲜样品来检测，不要存放时间过长。否则，蛋白质降解和变性可能发生，*终导致错误的结果。

7.标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测

兔谷氨酸脱羧酶1(GAD1) ELISA 试剂盒 96T/48T

ELISA试剂盒在使用之时还需要注意哪些问题？
1. elisa试剂盒应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。elisa试剂盒不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物a、b液时，避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物a应挥发，避免长时间打开盖子。底物b对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取od值。
8. 加入elisa试剂盒的顺序应一致，elisa试剂盒以所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
  

科研ELISA检测过程中的注意事项
1、要移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但*有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的后可长期保存。
12、底物是光敏感的，要在临用前现配。
13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
15、待检样品要澄清，否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验，这样才能数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

兔谷氨酸脱羧酶1(GAD1) ELISA 试剂盒 96T/48T

ELISA试剂盒实验数据的计算处理方法
1、拟和曲线：
输入首行： 浓度值， 如0 10 50 100 400
输入第二行：该浓度下的调整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据，用插入里的图表按钮，进入图表向导，在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”，按“下一步”;选择“系列产生在行”，按“下一步”;数据标志，可以填写：如数据y轴，OD值;数据x轴，浓度;按下一步，点击完成。可得曲线图。
单击曲线，按右键，选择“添加趋势线”，在类型中，选择多项式;在选项中，选择显示公式，选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法： 双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。

2、计算浓度：
实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例，已知OD值，计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0



ELISA试剂盒持续热销的原因
时光飞逝，转眼公司成立已经有好几个年头了，推销很重要，宣传很重要，而自身品质更重要，从客户的角度出发重要！注重细节、注重服务，并且品质足够硬，相信通过我们不断的努力定能够走的更久、更远！

1. 我们坚持掌握国际先进技术和信息，并引领国内行业方向。

2. 我们坚持产品质量的稳定性，可靠性。

3. 我们坚持及时了解客户需求，

一直保持跟国内重点实验室和多家科研单位紧密合作关系。

四大特性：    
1．特异性强：不与其它细胞因子反应。
2．重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。
3．稳定性高： 实验效果很稳定。
4．超灵敏度：检测浓度小于1号标准品，稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 


公司简介
上海笃玛生物科技有限公司主要经营生产ELISA试剂盒，抗体，原料药，植物提取物，品质。公司秉承价格低，品质好，客户之上的原则努力将生命科学产品提供给广大的科研工作者。
公司ELISA试剂盒采用原装进口抗体，一步孵育，一步洗板，操作时间需90分钟，就能得到准确的实验结果。刚开起的酶联板孔会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响，您尽可放心使用。本司专业研发各种种属ELISA试剂盒


免责声明
试剂盒供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。
严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。