人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒  96T/48T

标本的采集及保存

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。) 

结果分析

根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值，利用标准品绘制的标准曲线，计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理，通过计算得到待测样品的浓度。

*特别提醒*

1.取样和存样所用的冻存管、离心管、吸头等需高温灭菌处理；

2.所有存样管口需以封口膜封好；

3.所有样品管壁需要用防水记号笔清晰标明编号（便于区分即可）； 

免责声明

试剂盒供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。

严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒  96T/48T

实验原理

      试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。

人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒  96T/48T

操作步骤

1)涂层:微孔板的孔涂上捕获抗体或抗原。

2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛血清白蛋白或羧甲基纤维素)，阻止非特异性蛋

白质结合。

3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或抗体的样本。

4)洗涤:去除未结合的物质。

5)检测抗体添加:加入对特定抗原有特异性的酶标记检测抗体。

6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测抗体。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物产生颜色变化。

8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。

9) 读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下)，吸光度

与样本中抗原或抗体的浓度成正比。

试剂盒性能

1. 特异性高：由于是抗原抗体的特异性结合，因此试验的特异性很高，能够排除其他物质的干扰。

2. 灵敏度高：由于酶的放大作用，使得试验的灵敏度大大提高，能够检测出微量的抗原或抗体。

3. 操作简便：ELISA试验操作相对简单，容易掌握，适合于大规模样本检测。

4. 适用范围广：可以用于检测各种抗原、抗体和激素等生物分子。