人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 96T/48T

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒  96T/48T

 酶联免疫吸附测定优点：是一种敏感性高，特异性强,重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已应用在免疫学检。

标本的采集及保存

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒  96T/48T

标本的稀释原则：

    首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则：

    2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。   

操作注意事项：

　　1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

　　6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　7.加入试剂的顺序应一致，以所有反应板孔温育的时间一样。

　　8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒  96T/48T

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，

在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释

倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值

代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释

倍数，即为样品的实际浓度。

生物素标记抗体的稀释原则：

    临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：

    临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

试剂盒性能：

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批见应分别小于9%和15%

保存条件及保存期：

1.试剂盒保存：2-8℃。

2．保存期：6个月

标本的采集及保存

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

笃玛品质

售前：为客户提供全面技术咨询服务并提供说明书，任何咨询都会细心答复，无论购买与否。

售后：所有的elisa试剂盒如有质量问题，免费包换，为客户提供免费代测服务，每个技术性的问题都会为你耐心解决。

笃玛代测服务：

技术服务内容： 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

寄标本时需注明以下情况：1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；4、联系方式；5、实验后标本是否寄回。