大鼠单胺氧化酶A(MAOA) ELISA 试剂盒 96T/48T 实验步骤
产品报价:询价
更新时间:2024/2/2 13:49:32
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
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产品包装:盒装
性状:瓶装液体
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
保存期限:6个月
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
大鼠单胺氧化酶A(MAOA) ELISA 试剂盒 96T/48T 实验步骤
实验原理
酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种基于抗原抗体反应的免疫学检测方法。其基本原理是利用抗原抗体的特异性结合,通过酶对底物反应的显色反应,对样本中的待测物质进行定量或定性分析。ELISA方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适用范围广等特点,因此在生物医学研究、临床诊断和食品安全检测等领域得到了应用。
试剂盒组成
1. 酶标板:用于包被抗原和加入酶标抗体;
2. 酶标抗体:与待测血清中的样本结合;
3. 抗原:用于包被酶标板,与待测血清中的样本结合;
4. 阴性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;
5. 阳性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;
6. 洗涤液:用于清洗酶标板;
7. 底物:用于显色反应;
8. 终止液:用于终止显色反应。
实验步骤
1. 抗原包被:将抗原溶液加入到酶标板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一层薄膜。
2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。
3. 阻断:加入阻断液,封闭酶标板孔中的非特异性结合位点,以减少非特异性结合。
4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。
5. 加样:加入待测样本,使其与抗原发生特异性结合。
6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的样本和其他杂质。
7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,使其与特异性结合的样本中的待测物质发生反应。
8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体和其他杂质。
9. 显色反应:加入底物溶液,发生酶催化反应,产生有色产物。
10. 终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。
11. 检测:用酶标仪测定各孔的光密度值,记录数据。
结果分析
根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。
做ELISA标准曲线时需要重点注意的细节问题:
1、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限;而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
2、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
3、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要有5个点。
4、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
5、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
6、好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够确保标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
大鼠单胺氧化酶A(MAOA) ELISA 试剂盒 96T/48T 实验步骤
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