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大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒  说明书  96T/48T
大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒  说明书  96T/48T
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大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒 说明书 96T/48T

产品报价:询价

更新时间:2024/2/2 13:39:09

地:上海

牌:DUMABIO

号:96T/48T

厂商性质: 生产型,

公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司

产品关键词: 免费代测   准确稳定   售后无忧   特异性强   ELISA试剂盒  

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大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒  说明书  96T/48T 


产品包装:盒装

性状:瓶装液体

规格:96T/48T

保存条件:2-8℃

保存期限:6个月

运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。


大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒  说明书  96T/48T

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实验原理

酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种基于抗原抗体反应的免疫学检测方法。其基本原理是利用抗原抗体的特异性结合,通过酶对底物反应的显色反应,对样本中的待测物质进行定量或定性分析。ELISA方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适用范围广等特点,因此在生物医学研究、临床诊断和食品安全检测等领域得到了应用。


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试剂盒组成

1. 酶标板:用于包被抗原和加入酶标抗体;

2. 酶标抗体:与待测血清中的样本结合;

3. 抗原:用于包被酶标板,与待测血清中的样本结合;

4. 阴性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;

5. 阳性对照血清:用于设置阴性和阳性对照;

6. 洗涤液:用于清洗酶标板;

7. 底物:用于显色反应;

8. 终止液:用于终止显色反应。


实验步骤

1. 抗原包被:将抗原溶液加入到酶标板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一层薄膜。

2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。

3. 阻断:加入阻断液,封闭酶标板孔中的非特异性结合位点,以减少非特异性结合。

4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。

5. 加样:加入待测样本,使其与抗原发生特异性结合。

6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的样本和其他杂质。

7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,使其与特异性结合的样本中的待测物质发生反应。

8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体和其他杂质。

9. 显色反应:加入底物溶液,发生酶催化反应,产生有色产物。

10. 终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。

11. 检测:用酶标仪测定各孔的光密度值,记录数据。


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结果分析

根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。


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做ELISA标准曲线时需要重点注意的细节问题:

1、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限;而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度陡段,即曲线几乎成直线的范围内。

2、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。

3、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要有5个点。

4、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。

5、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。

6、好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够确保标准样品的浓度不会出现较大的偏离。


大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒  说明书  96T/48T

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