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牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T
牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T
  • 牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T

牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒 96T/48T

产品报价:询价

更新时间:2024/1/26 16:15:25

地:上海

牌:DUMABIO

号:96T/48T

厂商性质: 生产型,

公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司

产品关键词: 免费代测   好用便捷   准确稳定   特异性强   ELISA试剂盒  

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牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T



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ELISA试剂盒组成


试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1个

1个


酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:36U/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


















ELISA实验原理


本试剂盒基于检测样本的特异性抗体包被酶标板,加入待测样本,样本与包被在酶标板上的特异性抗体结合,形成免疫复合物。清洗后加入酶标二抗,与免疫复合物结合,形成完整的三明治复合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下变色,颜色的深浅与样本的浓度呈正相关。后加入终止液,使反应停止,在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值),通过标准曲线计算样本的浓度。


牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T

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操作步骤


1. 加样:设置空白孔、标准孔和待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl。注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。每次实验都应制作标准曲线。如果样品浓度过高,可以用样品稀释液进行稀释,使样品符合试剂盒的检测范围。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物su标记抗体工作液 100μl(取1μl生物su标记抗体加99μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

3. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物su标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

5. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。



牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T

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ELISA试剂盒实验数据的计算处理方法


1、拟和曲线:

输入第1行: 浓度值, 如0 10 50 100 400

输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42

选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。

单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。

得到公式和R平方值。

也可以用上面说的方法: 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。

2、计算浓度:

地1次实验:

标准曲线为:

y = -4E-05x2 + 0.026x

R2 = 0.9745

为例,已知OD值,计算浓度。

由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:

4E-05x2 -0.026x +y=0

ax2 +bx +y=0



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操作注意事项


1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。

7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


牛泛素羧基端酯酶L1(UCHL1) ELISA 试剂盒  96T/48T

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产品包装:盒装

性状:瓶装液体

规格:96T/48T

保存条件:2-8℃

保存期限:6个月

运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。


组织匀浆


1) 用预冷的PBS(0.01M,PH7.4)冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)。

2) 将组织块称重,然后切成尽可能小的碎块,以便充分匀浆。

3) 加入适量的预冷PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂),用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。

4) 将匀浆液吸入离心管中,2-8℃下以5000×g离心5分钟,收集上清液,保存至-20℃或-80℃,避免反复冻融。


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