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牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T
牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T
  • 牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T

牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理 96T/48T

产品报价:询价

更新时间:2024/1/26 16:02:46

地:上海

牌:DUMABIO

号:96T/48T

厂商性质: 生产型,

公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司

产品关键词: 免费代测   好用便捷   准确稳定   特异性强   ELISA试剂盒  

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牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T 


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样本实验准备


        在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,建议-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1. 血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2. 血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3. 尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5. 培养细胞

    检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6. 组织标本

    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。


牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T

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实验步骤


1. 抗原包被:将抗原溶液加入到酶标板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一层薄膜。

2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。

3. 阻断:加入阻断液,封闭酶标板孔中的非特异性结合位点,以减少非特异性结合。

4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。

5. 加样:加入待测样本,使其与抗原发生特异性结合。

6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的样本和其他杂质。

7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,使其与特异性结合的样本中的待测物质发生反应。

8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体和其他杂质。

9. 显色反应:加入底物溶液,发生酶催化反应,产生有色产物。

10. 终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。

11. 检测:用酶标仪测定各孔的光密度值,记录数据。


牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T

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试剂盒组成


试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1个

1个


酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

终止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

20倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

23ml×1瓶

2-8℃保存





结果计算方法如下


1.计算阴性对照A值的平均数(NCX )和阳性对照A值的平均数(PCX)。

2.两个平均数的差(P-N)必须大于一个特定的数值,例如0.400,试验才有用。

3.3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范围,则弃去,而已另两个阴性对照重新计算NCX;如有两个阴性对照A值超出以上范围,则该次实验无效。

4.阳性判定值按下式计算:阳性判定值=NCX+0.05。

5.标本A值>阳性判定值的为阳性,小于阳性判定值的为阴性。

需要注意的是,试剂盒的常数只适合于该特定条件下,而不是对各种试剂均可通用。


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注意事项


1. 实验前请仔细阅读本试剂盒的使用说明,确保所有材料、器具和试剂准备齐全。

2. 为了实验结果的准确性,请务必遵循实验步骤进行操作,并注意控制实验条件的一致性。

3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域,以免影响实验结果。

4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具,避免交叉污染。

5. 本试剂盒供体外诊断使用,使用前请仔细阅读说明书,如有疑问请及时联系厂家或专业技术人员。


牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理  96T/48T638393610359604944618.jpg


试剂盒性能


1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。


合作单位


医科大学、复旦大学、北京大学、贵阳医学院、农业大学

天津疾控中心、江南大学、山东大学、青岛大学、香港大学

云南省产品质量监督检验研究院


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