牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理 96T/48T
产品报价:询价
更新时间:2024/1/26 16:02:46
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)产品报价:询价
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样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,建议-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理 96T/48T
实验步骤
1. 抗原包被:将抗原溶液加入到酶标板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一层薄膜。
2. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的抗原和其他杂质。
3. 阻断:加入阻断液,封闭酶标板孔中的非特异性结合位点,以减少非特异性结合。
4. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的阻断液和其他杂质。
5. 加样:加入待测样本,使其与抗原发生特异性结合。
6. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的样本和其他杂质。
7. 加酶标抗体:加入酶标记的抗体,使其与特异性结合的样本中的待测物质发生反应。
8. 清洗:清洗酶标板,去除未结合的酶标抗体和其他杂质。
9. 显色反应:加入底物溶液,发生酶催化反应,产生有色产物。
10. 终止反应:加入终止液,停止酶催化反应。
11. 检测:用酶标仪测定各孔的光密度值,记录数据。
牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理 96T/48T
试剂盒组成
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 23ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
结果计算方法如下
1.计算阴性对照A值的平均数(NCX )和阳性对照A值的平均数(PCX)。
2.两个平均数的差(P-N)必须大于一个特定的数值,例如0.400,试验才有用。
3.3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范围,则弃去,而已另两个阴性对照重新计算NCX;如有两个阴性对照A值超出以上范围,则该次实验无效。
4.阳性判定值按下式计算:阳性判定值=NCX+0.05。
5.标本A值>阳性判定值的为阳性,小于阳性判定值的为阴性。
需要注意的是,试剂盒的常数只适合于该特定条件下,而不是对各种试剂均可通用。
注意事项
1. 实验前请仔细阅读本试剂盒的使用说明,确保所有材料、器具和试剂准备齐全。
2. 为了实验结果的准确性,请务必遵循实验步骤进行操作,并注意控制实验条件的一致性。
3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域,以免影响实验结果。
4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具,避免交叉污染。
5. 本试剂盒供体外诊断使用,使用前请仔细阅读说明书,如有疑问请及时联系厂家或专业技术人员。
牛赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4) ELISA 试剂盒实验原理 96T/48T
试剂盒性能
1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
合作单位
医科大学、复旦大学、北京大学、贵阳医学院、农业大学
天津疾控中心、江南大学、山东大学、青岛大学、香港大学
云南省产品质量监督检验研究院
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