牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
产品报价:询价
更新时间:2024/1/22 14:07:53
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)产品报价:询价
更新时间:2024/1/22 14:07:53
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
实验原理
酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种基于抗原抗体反应的免疫学检测方法。其基本原理是利用抗原抗体的特异性结合,通过酶对底物反应的显色反应,对样本中的待测物质进行定量或定性分析。ELISA方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适用范围广等特点,因此在生物医学研究、临床诊断和食品安全检测等领域得到了应用。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
植物样本处理:
植物组织的提取,不管是根茎组织还是叶片组织还是果实组织,都应该采用鲜重的计重方式,一般要遵循以下原则:
1.称取的组织重量不能低于50mg。
2.匀浆的比例按照10%,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
3.组织在匀浆器匀浆过程中,匀浆液应该分2次加进去,这样匀浆更充分。
4.充分匀浆完成后离心取上清,离心机的转数选取2000-3000转每分,转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟。
准备工作
1.孔板室温平衡1小时
2.做好布板图谱
3.样本解冻
4.准备各型号的移液枪、枪头、量筒
5.准备双蒸水
6.根据样本量配好样本希释液
7.根据样本量及洗板次数配好洗液
8.若需要提前设置好振板器、洗板器
9.准备足够量的擦手纸
10.根据说明书提示,溶解标准品
11.配制不同浓度的标准品
12.配制质控品
13.根据预实验结果稀释样本
14.准备好封板膜
牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
实验步骤
1. 准备:准备好所有试剂、材料和器具。
2. 温育:将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。
3. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本,轻轻混匀。
4. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
5. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的抗原抗体。
6. 加酶标二抗:向各孔中加入酶标二抗,轻轻混匀。
7. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
8. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的酶标二抗。
9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,轻轻混匀。
10. 显色:将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。
11. 终止:向各孔中加入终止液,混匀。
12. 测量:在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值)。
试剂盒组成
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
试剂盒会出现的问题及解决办法:
1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:试剂盒内容物未能充分回。
解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。
解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:试剂盒已过保质期。
解决办法:请更换成仍在保质期内的试剂盒。
2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。
a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。
解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。
b.原因:操作时间拖太久。
解决办法:请在方法熟练后再进行操作。
c.原因:微孔间相互污染。
解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。
e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。
解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。
f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。
解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
牛色胺酸羟化酶1(TPH1) ELISA 试剂盒 96T/48T
3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。
a.原因:室温太高(>25℃)。
解决办法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。
b.原因:底物溶液受到污染。
解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。
c.原因:反应时间超过太久。
解决办法:请控制反应时间。
d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。
解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)
4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。
a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。
解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。
b.原因:洗板过程发生问题(同2-f.)。
解决办法:请参考2-f.
c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。
解决办法: 请参考2-d.
相关产品
DM-Cat5088 | 牛腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1) ELISA 试剂盒 | Cattle CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit |
DM-Cat5089 | 牛糖抗原125(CA125) ELISA 试剂盒 | Cattle CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit |
DM-Cat5090 | 牛糖链抗原19-9(CA19-9) ELISA 试剂盒 | Cattle CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit |
DM-Cat5091 | 牛糖缺失性转铁蛋白(CDT) ELISA 试剂盒 | Cattle CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit |
DM-Cat5092 | 牛碳酸酐酶I(CA1) ELISA 试剂盒 | Cattle CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit |
DM-Cat5093 | 牛碳酸酐酶II(CA2) ELISA 试剂盒 | Cattle CA2 (Carbonic Anhydrase II) ELISA Kit |
DM-Cat5094 | 牛一氧化碳血红蛋白(HbCO) ELISA 试剂盒 | Cattle HbCO (Carboxyhemoglobin) ELISA Kit |
DM-Cat5095 | 牛癌胚抗原(CEA) ELISA 试剂盒 | Cattle CEA (Carcinoembryonic Antigen) ELISA Kit |
DM-Cat5096 | 牛锚蛋白重复域1(ANKRD1) ELISA 试剂盒 | Cattle ANKRD1 (Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit |
DM-Cat5097 | 牛心肌肌钙蛋白T(cTnT/TNNT2) ELISA 试剂盒 | Cattle cTnT/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit |
DM-Cat5098 | 牛心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1) ELISA 试剂盒 | Cattle CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit |
DM-Cat5099 | 牛白介素7(IL-7) ELISA 试剂盒 | Cattle IL-7 (Interleukin 7) ELISA Kit |
DM-Cat5100 | 牛心肌肌钙蛋白I(cTn-I/TNNI3) ELISA 试剂盒 | Cattle cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I)ELISA Kit |
DM-Cat5101 | 牛心肌营养素合成酶/心磷脂合酶(CLS) ELISA 试剂盒 | Cattle CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit |
DM-Cat5102 | 牛心肌营养素1(CT-1) ELISA 试剂盒 | Cattle CT-1 (Cardiotrophin 1) ELISA Kit |
DM-Cat5103 | 牛心肌营养素样细胞因子1(CLCF1) ELISA 试剂盒 | Cattle CLCF1 (Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1) ELISA Kit |
DM-Cat5104 | 牛蛋白酶激活受体1(PAR1) ELISA 试剂盒 | Cattle PAR1 (Protease Activated Receptor 1) ELISA Kit |
DM-Cat5105 | 牛软骨寡聚基质蛋白(COMP) ELISA 试剂盒 | Cattle COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit |
DM-Cat5106 | 牛胱天蛋白酶10(CASP10) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP10 (Caspase 10) ELISA Kit |
DM-Cat5107 | 牛胱天蛋白酶11(CASP11) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP11 (Caspase 11) ELISA Kit |
DM-Cat5108 | 牛胱天蛋白酶12(CASP12) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP12 (Caspase 12) ELISA Kit |
DM-Cat5109 | 牛胱天蛋白酶14(CASP14) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit |
DM-Cat5110 | 牛胱天蛋白酶8(CASP8) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit |
DM-Cat5111 | 牛胱天蛋白酶4(CASP4) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit |
DM-Cat5112 | 牛胱天蛋白酶7(CASP7) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit |
DM-Cat5113 | 牛胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD) ELISA 试剂盒 | Cattle CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit |
DM-Cat5114 | 牛胱天蛋白酶9(CASP9) ELISA 试剂盒 | Cattle CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit |
DM-Cat5115 | 牛α1连接素(CTNNα1) ELISA 试剂盒 | Cattle CTNNα1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit |
DM-Cat5116 | 牛β1连接素(CTNNβ1) ELISA 试剂盒 | Cattle CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit |
DM-Cat5117 | 牛组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒 | Cattle CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit |
DM-Cat5118 | 牛组织蛋白酶K(CTSK) ELISA 试剂盒 | Cattle CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit |