牛血小板反应蛋白解整合素金属肽酶12(ADAMTS12) ELISA 试剂盒 96T/48T
产品报价:询价
更新时间:2024/1/15 11:23:27
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)产品报价:询价
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实验原理
1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。
2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。
3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。
牛血小板反应蛋白解整合素金属肽酶12(ADAMTS12) ELISA 试剂盒 96T/48T
样本处理
1.组织取出前尽量进行心脏灌流
2.组织表面不能有毛发等不相关组分
3.组织称重(mg)后立即放入EP管中
4.向EP管中加入9倍量的PBS (μL)
5.用匀浆机进行组织匀浆
6.离心
7.小心吸取上清
牛血小板反应蛋白解整合素金属肽酶12(ADAMTS12) ELISA 试剂盒 96T/48T
实验步骤
1. 准备试剂盒:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟以上,使试剂盒恢复至室温。
2. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板胶纸封住反应孔,轻轻振荡混匀,37℃孵育1小时。
4. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
5. 加酶标二抗:每孔加入50μl酶标二抗溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育15-20分钟。
8. 终止反应:每孔加入50μl终止液,轻轻振荡混匀。
9. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。
标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物su标记抗体的稀释原则:临用前以生物su标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su标记抗体加990μl生物su标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
注意事项
1. 实验前请仔细阅读本试剂盒的使用说明,确保所有材料、器具和试剂准备齐全。
2. 为了实验结果的准确性,请务必遵循实验步骤进行操作,并注意控制实验条件的一致性。
3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域,以免影响实验结果。
4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具,避免交叉污染。
5. 本试剂盒只供体外诊断使用,使用前请仔细阅读说明书,如有疑问请及时联系厂家或专业技术人员。
牛血小板反应蛋白解整合素金属肽酶12(ADAMTS12) ELISA 试剂盒 96T/48T
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