牛甘氨酸脱氢酶(GLDC) ELISA 试剂盒 96T/48T
产品报价:询价
更新时间:2024/1/12 11:12:44
产地:上海
品牌:DUMABIO
型号:96T/48T
厂商性质: 生产型,
公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)产品报价:询价
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孙涵 : (15214367449) (4009681786)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)牛甘氨酸脱氢酶(GLDC) ELISA 试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
牛甘氨酸脱氢酶(GLDC) ELISA 试剂盒 96T/48T
检测前准备工作
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。
4. 生物su化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物su化抗体稀释液稀释浓缩生物su化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。
当日使用。
实验步骤
1. 准备:准备好所有试剂、材料和器具。
2. 温育:将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。
3. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本,轻轻混匀。
4. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
5. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的抗原抗体。
6. 加酶标二抗:向各孔中加入酶标二抗,轻轻混匀。
7. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
8. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的酶标二抗。
9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,轻轻混匀。
10. 显色:将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。
11. 终止:向各孔中加入终止液,混匀。
12. 测量:在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值)。
牛甘氨酸脱氢酶(GLDC) ELISA 试剂盒 96T/48T
注意事项
1. 试剂盒保存于2-8℃,切勿反复冻融或长时间保存于室温。
2. 实验前确保所有试剂均已恢复至室温。
3. 加样时注意避免产生气泡。
4. 洗涤时要充分洗涤,避免残留物影响实验结果。
5. 底物溶液应避光保存,避免长时间暴露于空气中。
6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数,其他波长可能导致误差。
7. 本试剂盒用于科研实验和诊断参考,不适用于临床诊断和治疗。
牛甘氨酸脱氢酶(GLDC) ELISA 试剂盒 96T/48T
洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
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