产品报价：询价
更新时间：2024/1/12 11:06:07
产地：上海
品牌：DUMABIO
型号：96T/48T
厂商性质： 生产型,
公司名称： 上海笃玛生物科技有限公司
孙涵 : (15214367449) (4009681786)
（联系我时，请说明是在来宝网上看到的，谢谢！）牛肽酶D(PEPD) ELISA 试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
牛肽酶D(PEPD) ELISA 试剂盒 厂家 96T/48T
检测前准备工作
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。当日使用。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为8000pg/mL）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品：取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。
4. 生物su化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以生物su化抗体稀释液稀释浓缩生物su化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。
当日使用。
实验步骤
1. 准备：准备好所有试剂、材料和器具。
2. 温育：将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。
3. 加样：分别向各孔中加入标准品、待测样本，轻轻混匀。
4. 温育：将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
5. 洗涤：清洗酶标板，除去未结合的抗原抗体。
6. 加酶标二抗：向各孔中加入酶标二抗，轻轻混匀。
7. 温育：将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
8. 洗涤：清洗酶标板，除去未结合的酶标二抗。
9. 加底物溶液：向各孔中加入底物溶液，轻轻混匀。
10. 显色：将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。
11. 终止：向各孔中加入终止液，混匀。
12. 测量：在450nm波长下测量各孔的光密度值（OD值）。
牛肽酶D(PEPD) ELISA 试剂盒 厂家 96T/48T
注意事项
1. 试剂盒保存于2-8℃，切勿反复冻融或长时间保存于室温。
2. 实验前确保所有试剂均已恢复至室温。
3. 加样时注意避免产生气泡。
4. 洗涤时要充分洗涤，避免残留物影响实验结果。
5. 底物溶液应避光保存，避免长时间暴露于空气中。
6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数，其他波长可能导致误差。
7. 本试剂盒用于科研实验和诊断参考，不适用于临床诊断和治疗。
牛肽酶D(PEPD) ELISA 试剂盒 厂家 96T/48T
洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
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