兔富含半胱氨酸型酸性蛋白(SPARC) ELISA 试剂盒

实验原理

1. 抗体或抗原的吸附：将待测抗原或抗体吸附到固相载体上，常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团，能够与待测抗原或抗体特异性结合。

2. 酶标记的抗体或抗原的结合：将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合，形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力，能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。

3. 底物显色反应：当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时，酶能够催化底物分解，产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度，可以判断待测抗原或抗体的浓度。

标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 

标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 

实验步骤

1. 准备试剂盒：将试剂盒从冰箱中取出，室温放置30分钟以上，使试剂盒恢复至室温。

2. 加样：分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板胶纸封住反应孔，轻轻振荡混匀，37℃孵育1小时。

4. 洗涤：甩去孔内液体，用洗涤液充分洗涤4-5次，每次30秒。

5. 加酶标二抗：每孔加入50μl酶标二抗溶液，轻轻振荡混匀，37℃孵育30分钟。

6. 洗涤：甩去孔内液体，用洗涤液充分洗涤4-5次，每次30秒。

7.加底物：每孔加入50μl底物溶液，轻轻振荡混匀，37℃孵育15-20分钟。

8. 终止反应：每孔加入50μl终止液，轻轻振荡混匀。

9. 读数：用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。

兔富含半胱氨酸型酸性蛋白(SPARC) ELISA 试剂盒厂家96T/48T 

试剂盒组成

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注意事项

1. 试剂盒保存于2-8℃，切勿反复冻融或长时间保存于室温。

2. 实验前确保所有试剂均已恢复至室温。

3. 加样时注意避免产生气泡。

4. 洗涤时要充分洗涤，避免残留物影响实验结果。

5. 底物溶液应避光保存，避免长时间暴露于空气中。

6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数，其他波长可能导致误差。

7. 本试剂盒用于科研实验和诊断参考，不适用于临床诊断和治疗。

售后服务

试剂盒售后：本公司出售的试剂盒均保质保量，质量问题均可免费退换，另提供免费代测服务。

细胞售后：

1、细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2、细胞收到当天以及第2,3天请拍照，未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题，请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤，并跟我公司人员及时沟通判定是否重发，具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。

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