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兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 注意事项96T/48T
兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 注意事项96T/48T
  • 兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 注意事项96T/48T

兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 注意事项96T/48T

产品报价:询价

更新时间:2023/12/25 16:20:29

地:上海

牌:ELISA试剂盒

号:96T/48T

厂商性质: 生产型,

公司名称: 上海笃玛生物科技有限公司

产品关键词: 特异性强   重复性好   酶联免疫试剂盒   快速检测   ELISA试剂盒  

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兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 


实验原理

原理3.jpg


    1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。

2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。

3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。

 

 

 

样品收集、处理及保存方法


1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。


 

 

 

试剂盒组成

 

说明书.png


兔转录激活因子-4(ATF-4) ELISA 试剂盒 注意事项96T/48T


操作步骤 

 

操作步骤3.jpg


1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;

3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本xishi液 40μL;

4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。

6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。



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结果分析

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 


图片1.png

 

注意事项


1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。

7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项.jpg



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