泰克生物是由一群多年从事临床前CRO服务和人用生物药开发的科学家组建的团队,旨在为客户提供先进研发理念、质量管理等一体化的抗体药物发现服务。主要服务对象涉及来自各个地方的各个生物医药公司以及科研院校。基于噬菌体展示技术平台和酵母展示技术平台,我们专注于为客户提供高质量的抗体候选分子的发现以及验证服务。
█ 抗体药物候选分子发现平台是什么?
抗体药物候选分子发现平台是指利用特定的技术方法,如噬菌体展示技术,酵母展示和单B细胞测序技术将血液中特异性能够结合肿瘤生物标记物(biomarker)或某些特定靶蛋白的抗体序列(基因序列)给呈现出来,供科学家后续有价值的改造以达到治疗疾病的目的。
由于同一种物种,以IgG形式存在的抗体,恒定区(即Fc片段)的氨基酸序列是固定不变的,因此在靶向特异性靶点的抗体发现过程中,科学家们更加侧重的是发现其可变区域的氨基酸序列,即所谓的抗体片段,如scFvs、Fabs和VHH/VH。大量的文献以及实验均能够说明这些抗体片段,能够在体外很好的结合靶抗原,因此也为噬菌体抗体文库展示,酵母文库展示技术奠定了扎实的文库筛选实验基础。
泰克生物基于噬菌体抗体文库展示技术和酵母文库展示技术双平台,能够为客户提供从0到1的抗体药物候选分子基因序列以及氨基酸序列的发现服务。积累的项目经验,我们从PBMC细胞开始,只需4-6周即可拿到候选抗体基因序列,除此之外,我们预制了羊驼(来自600头羊驼的天然PBMC细胞库)、骆驼以及人源的噬菌体展示抗体文库,能够为客户尽可能快速的抗体筛选服务。不同的抗体片段形式如图1所示:
图1不同形式抗体示意图
█ 噬菌体抗体展示技术平台
泰克生物提供的噬菌体抗体展示是指利用M13噬菌体壳蛋白P3的组装特性,将抗体可变区与P3蛋白进行融合共表达,再利用生物垂钓技术,将能够跟靶抗原结合的P3-抗体融合子筛选出来,经过基因测序后获得靶抗原特异性抗体序列。
该技术将基因型与表型、分子结合活性与噬菌体的可扩增性结合在一起,是一种筛选新技术。已成功应用于抗原表位分析,单抗筛选,蛋白质功能拮抗多肽或模拟多肽的确定等,具有筛选容量大、可发酵大量生产、方法简单等优点。其在疫苗设计等方面发挥重要作用。噬菌体展示技术如图2所示:
图2 噬菌体展示技术示意图
█ 酵母抗体展示技术平台
酵母抗体展示技术(Yeast Display Technology)是指用抗体序列可变区与凝集素Aga2p融合表达,Aga2p蛋白亚基通过两个二硫键与固定在酵母细胞壁上的Aga1p 蛋白亚基结合,结合流式分选技术,将靶向抗原的特异性抗体给筛选出来。酵母展示技术如图3所示:
图3 酵母展示技术示意图
抗体酵母展示文库技术与抗体噬菌体展示技术相比,酵母表面展示具有的特点是:
特点1:酵母属于真核表达,对于不同的抗体基因不具有偏向性,即受到抗体基因毒性的影响可以忽略不计;
特点2:酵母展示是多价展示,FACS分选阳性信噪比高,通过使用双染色分选技术,能够将高亲和力的抗体直接分选出来 。
█ 我们提供的噬菌体与酵母展示技术服务亮点
? 物种适应性丰富:人,鼠,兔,羊,羊驼,骆驼,鱼等物种的单抗开发均兼容;
? 技术平台成熟:噬菌体展示技术提供1级免疫文库的建库库容为108-109,酵母展示技术平台提供的1级免疫文库的建库库容为107-108;二者插入率均满足>95%,筛选获得的抗体亲和力普遍处于nM- pM级别;
? 开发周期短:获得PBMC后,建库到筛选获得抗体序列,3-4周;
? 产品交付标准高:针对免疫库,交付免疫前后血清,抗体展示文库,筛选洗脱产物,抗体序列;
? 文库淘筛定制化(噬菌体展示方式):根据客户需求不同以及靶点性质不同,会设计不同的筛选方法,如固相,固相/液相和细胞筛选;
? 实验记录可追溯:QC质控标准(含RNA提取,cDNA制备等),中英文实验报告,手写实验记录本 。