蛋白质免疫印迹和电转移服务-检测技术服务-BTP530

蛋白质免疫印迹和电转移服务-检测技术服务-BTP530-详情

电泳分离的蛋白质从凝胶基质转移或“印迹”到膜（通常是硝suān纤维素或PVDF）上，然后在膜表面进行基于抗体的后续检测，称为蛋白质免疫印迹（Western Blot或immunoblotting）。百泰派克生物科技提供蛋白质免疫印迹分析服务，蛋白质免疫印迹法通过gāo选择xìng和gāo敏感的抗体-抗原相互作用，可用于从复杂蛋白质混合物中检测特定的目标蛋白质，例如组织匀浆或细胞提取物等。所得数据可用于对目标蛋白质进行定xìng和半定量分析。

蛋白质免疫印迹和电转移服务-检测技术服务-BTP530:电转移一般流程图

蛋白免疫印迹是一种广fàn使用的蛋白质分析技术，可用于检测组织匀浆或提取物样品中的特定蛋白质。蛋白免疫印迹法使用凝胶电泳法分别通过3-D结构和多肽链的长度对天然蛋白质及变xìng蛋白质进行分离，分离后的蛋白质被转移到膜（通常是硝suān纤维素膜或PVDF）上，zuì后在膜上用对目标蛋白质具有特异xìng的抗体进行特异xìng识别。Western Blot广fàn应用于分子生物学、生物化学、免疫遗传学和其他分子生物学领域。

在蛋白免疫印迹分析中，shǒu先利用各种方法，如SDS-PAGE和IEF，通过等电点（pI）、分子量、电荷或这些因素的组合，从凝胶电泳中分离出样品中的蛋白质。常用SDS-PAGE进行分离，因为所有蛋白质都被溶解在凝胶内，沿相同方向迁移，结合SDS的变xìng作用，抗原表位gèng容易被识别。

凝胶电泳分析之后，将蛋白质从凝胶转移至由硝suān纤维素或聚偏二氟乙烯（PVDF）制成的膜上，以用于抗体检测。PVDF膜与蛋白质的结合能力比硝suān纤维素膜gènggāo，但硝suān纤维素膜与较小蛋白质结合的gèng好。转移蛋白质的主要方法是电印迹，电印迹法使用电流将蛋白质从凝胶中拉入PVDF或硝suān纤维素膜中。电泳转移方法包括：湿法转印、半干转印和半湿转印。如果使用等电点聚焦进行蛋白质分离，那么利用压力转印扩散来转移蛋白质gèng为yǒu效。

转印过程从一个小时（半干转印）到过夜转印（湿法转印），时间不等。转印完成后，膜的自由结合位点被蛋白质混合物封闭，因此后续抗体检测不会受到干扰。即可对转印到膜上的蛋白质进行抗体检测。包含蛋白质的膜shǒu先与一抗进行孵育，然后再由识别一抗的二抗结合后进行检测。二抗一般带有报告基团，并具有很gāo的灵敏度。

zuì灵敏的检测方法是使用增强化学发光（ECL）：通过抗体-辣根结合物对一抗进行识别。使用增强化学发光的特殊变体，可检测低至1 pg的蛋白条带。

蛋白免疫印迹还可用于追踪蛋白质的磷suān化，与磷suān化蛋白质的所有亚型相结合的抗体会在二维凝胶上呈现“念珠状”外观。也可用于鉴定免疫共沉淀产生的复合物中的已知蛋白和未知蛋白，只要目标蛋白质在凝胶中，就可以通过考马斯亮蓝染色，从凝胶中切出相应的斑点，进行后续质谱鉴定。

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其它服务项目

蛋白分析

蛋白质组学

代谢组学

多组学整合分析

生物制药分析

单细胞分析

检测平台

基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台：该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、 ProteinSimple凝胶成像系统、gāo效液相色谱系统，为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航，包括样品制备、分离纯化、分子量测量、杂质表征表达研究等；

基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台：该平台配备了超gāo效液相色谱质谱联用，Orbitrap Fusion Lumos Tribri，Thermo Scientific Exploris以及氢氘交换质谱仪配合机械臂为蛋白质组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段，包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究；

生物药物表征平台： 该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪，氢氘交换质谱仪配备机械臂，为生物药物表征提供了全面的分析手段，包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究；

基于10x Genomics的单细胞分析平台：该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程，包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及gāo通量测序；

基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台：采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪（Mass Cytometry System for Single Cell Analysis）用于单细胞质谱分析，该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析；

基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台：基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台，能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究；

生信云平台：基于生物信息分析方法的生信云平台，能够完成一整套的生物信息学解决方案，包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。

特色项目

一、蛋白测序

蛋白测序服务两种主要分析方法

E蛋白测序服务两种主要分析方法：Edman降解（Harvey和Ferrier，2011； Bauer等，1997）和质谱分析（MS）（Sahukar等，2016）。蛋白质测序和鉴定常用质谱法，Edman降解法是表征蛋白质N端重要的方法之一。

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司Edman降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于Edman降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

蛋白测序服务流程

蛋白测序服务yōu势

1 .采用世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 One hundred percent 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品jǐn需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

蛋白质组的研究不jǐn能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。确实，那些世界范围内销路好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。因此，蛋白质组学研究不jǐn是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益。蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及gāo通量修饰组学等研究工作。

不同技术的比较

蛋白质组学服务yōu势

1 .gāo通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度gāo，实验结果重复度gāo;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

单细胞质谱流式（Mass Cytometry）技术利用质谱技术对单细胞进行多参数检测，既有传统流式细胞术能够gāo速分析的特点，又兼并了质谱检测的gāo分辨能力。能够指定检测蛋白，避免漏掉丰度很低但又很重要的蛋白，且质谱流式技术通量相当gāo，可以实现大量细胞的检测。

百泰派克生物科技单细胞质谱流式分析方案

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

单细胞质谱流式服务yōu势

①技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

②分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提gāo，且成本不gāo于单细胞RNAseq。

③应用前景大

a)流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有jí大的研究前景；

b)将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

c)可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、gāo度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们yōu化的gāo通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现分析策略

结果交付

1.所有鉴定的免疫多肽列表，新抗原肽以及肿瘤相关抗原肽列表；
2. 免疫多肽组数据质量分析，如研究案例中的数据报告。

五、生物药物表征

生物制药是通过现代医学研究手段结合生物生产技术研发生物医药技术产品，主要包括蛋白质、多肽、抗体、疫苗，以及生物诊断试剂等产品。近年来我国的生物医药领域一直保持着稳定发展速度，也一直占据着生物研究的热点。但是生物制品由于生物过程复杂，影响因素众多，使得生物制品在生产过程中可能引入新的杂质，或者造成生物制品本身结构性质变得不均一。这些因素可能削弱生物药物的疗效，甚至造成生物毒性和机体免疫反应等不良结果。所以生物药物在进入临床测试之前必须经过一系列严格检测来确定生物药物是否合规。百泰派克了解生物制药领域开发所面临的挑战，专注于提供完整的生物药物鉴定和分析服务。

百泰派克基于gāo分辨率质谱技术，MALDI TOF，gāo效色谱分离技术，提供一系列的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供yōu质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提gāo生物药物品质。

生物药物表征服务内容

百泰派克生物科技-生物药物表征，生物质谱多组学yōu质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循CDE、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量tǐ系rèn证，建立了完备的质量tǐ系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报zhù册和生产放行。
1、公司采用ISO9001质量控制tǐ系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；
2、guó家CNAS实验室认可，为客户提供符合quán球药政法规的药物质量研究服务；
3、业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；
4、7大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；
5、服务3000+企业，10000+客户的选择；
6、致力于为您提供yōu质的生物质谱分析服务!