蛋白质水解-检测技术服务-BTP5

蛋白质水解-检测技术服务-BTP5-详情

自然界中发现的蛋白质大小从5kDa到400kDa不等。蛋白质水解过程将蛋白质切成较短片段，即肽段，蛋白质水解是肽质谱鉴定分析之前至关重要的一步，是蛋白质鉴定和表征、生物标记物的发现成功进行的基础。尽管质谱可以研究完整的蛋白质，但是较小的肽gèng容易进行蛋白质鉴定。且可提gāo蛋白质的覆盖率，因为蛋白质覆盖率由于溶解xìng和异质xìng可能会降低。因此，zuì常见的蛋白质组学方法往往会利用位点特异xìng酶切位点来产生较小的多肽片段。质量较小的肽段gèng容易通过gāo效液相色谱（HPLC）和HPLC偶联质谱进行分离和表征。

蛋白质水解-检测技术服务-BTP5:百泰派克基于质谱的蛋白鉴定示例

BTP-蛋白质水解服务

百泰派克生物科技提供两种水解蛋白质的方法：（1）凝胶内水解（聚丙烯酰胺凝胶基质中的蛋白质水解）；（2）溶液内水解（蛋白质在氯仿/甲醇中沉淀，然后在尿素中再溶解后进行）。通过一维或二维凝胶电泳分离的蛋白质，可直接在凝胶内进行水解，凝胶内水解，yǒu效且可重现好，但比较费力费时。相较于凝胶内水解，溶液内水解方法gèng省力，所需的时间较少，但溶液内水解的蛋白，蛋白的再溶解度低，可能会导致一定的样品损失。

蛋白质水解的流程

百泰派克生物科技可同时提供凝胶内水解和溶液内水解两种蛋白质水解相关服务。蛋白质水解的工作流程包括：

1. 制备裂解液；

2. 溶液内或凝胶内进行酶切;

3. 使用离液剂（如尿素和胍）使蛋白质变xìng；

4. 使用DTT还原二硫键；

5. 使用碘乙suān或碘乙酰胺将半胱氨suān烷基化；

6. 去除试剂和交换缓冲液；

7. 在适当的pH和温度下，用胰蛋白酶或其他蛋白酶在碳suān氢铵缓冲液中过夜变xìng约18小时；

8. 加入suān类物质终止酶切。

9. 蛋白质富集/清洗。

蛋白质水解-检测技术服务-BTP5:蛋白质水解的工作流程

样品要求

百泰派克生物科技可处理各种类型的样本，包括但不限于：

天然来源的蛋白质；

重组来源的融合蛋白和标记蛋白；

不同亚型的抗体；

膜蛋白及其他。

蛋白质酶切的yōu点

? 灵活xìng：我们提供凝胶内和溶液内水解两种蛋白质水解策略；

? gāo准确xìng和覆盖范围：我们的水解服务可以大大提gāo质谱分析的准确xìng和覆盖范围。

? 应用广fàn：可促进蛋白质的鉴定和表征，发现疾病的生物标志物，并有助于理解生物学过程。

? 完整的蛋白质组学服务：我们提供完整的蛋白质组学服务，涵盖蛋白质组学分析的整个过程，可对水解后的样品进行分析测定，一站式为您解决组学问题。

百泰派克生物科技还提供gāo通量自动化蛋白质水解服务，欢迎咨询。

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其它服务项目

蛋白分析

蛋白质组学

代谢组学

多组学整合分析

生物制药分析

单细胞分析

检测平台

基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台：该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、 ProteinSimple凝胶成像系统、gāo效液相色谱系统，为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航，包括样品制备、分离纯化、分子量测量、杂质表征表达研究等；

基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台：该平台配备了超gāo效液相色谱质谱联用，Orbitrap Fusion Lumos Tribri，Thermo Scientific Exploris以及氢氘交换质谱仪配合机械臂为蛋白质组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段，包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究；

生物药物表征平台： 该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪，氢氘交换质谱仪配备机械臂，为生物药物表征提供了全面的分析手段，包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究；

基于10x Genomics的单细胞分析平台：该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程，包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及gāo通量测序；

基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台：采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪（Mass Cytometry System for Single Cell Analysis）用于单细胞质谱分析，该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析；

基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台：基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台，能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究；

生信云平台：基于生物信息分析方法的生信云平台，能够完成一整套的生物信息学解决方案，包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。

特色项目

一、蛋白测序

蛋白测序服务两种主要分析方法

E蛋白测序服务两种主要分析方法：Edman降解（Harvey和Ferrier，2011； Bauer等，1997）和质谱分析（MS）（Sahukar等，2016）。蛋白质测序和鉴定常用质谱法，Edman降解法是表征蛋白质N端重要的方法之一。

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司Edman降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于Edman降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

蛋白测序服务流程

蛋白测序服务yōu势

1 .采用世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 One hundred percent 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品jǐn需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

蛋白质组的研究不jǐn能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。确实，那些世界范围内销路好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。因此，蛋白质组学研究不jǐn是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益。蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及gāo通量修饰组学等研究工作。

不同技术的比较

蛋白质组学服务yōu势

1 .gāo通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度gāo，实验结果重复度gāo;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

单细胞质谱流式（Mass Cytometry）技术利用质谱技术对单细胞进行多参数检测，既有传统流式细胞术能够gāo速分析的特点，又兼并了质谱检测的gāo分辨能力。能够指定检测蛋白，避免漏掉丰度很低但又很重要的蛋白，且质谱流式技术通量相当gāo，可以实现大量细胞的检测。

百泰派克生物科技单细胞质谱流式分析方案

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

单细胞质谱流式服务yōu势

①技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

②分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提gāo，且成本不gāo于单细胞RNAseq。

③应用前景大

a)流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有jí大的研究前景；

b)将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

c)可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、gāo度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们yōu化的gāo通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

基于gāojīng度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现分析策略

结果交付

1.所有鉴定的免疫多肽列表，新抗原肽以及肿瘤相关抗原肽列表；
2. 免疫多肽组数据质量分析，如研究案例中的数据报告。

五、生物药物表征

生物制药是通过现代医学研究手段结合生物生产技术研发生物医药技术产品，主要包括蛋白质、多肽、抗体、疫苗，以及生物诊断试剂等产品。近年来我国的生物医药领域一直保持着稳定发展速度，也一直占据着生物研究的热点。但是生物制品由于生物过程复杂，影响因素众多，使得生物制品在生产过程中可能引入新的杂质，或者造成生物制品本身结构性质变得不均一。这些因素可能削弱生物药物的疗效，甚至造成生物毒性和机体免疫反应等不良结果。所以生物药物在进入临床测试之前必须经过一系列严格检测来确定生物药物是否合规。百泰派克了解生物制药领域开发所面临的挑战，专注于提供完整的生物药物鉴定和分析服务。

百泰派克基于gāo分辨率质谱技术，MALDI TOF，gāo效色谱分离技术，提供一系列的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供yōu质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提gāo生物药物品质。

生物药物表征服务内容

百泰派克生物科技-生物药物表征，生物质谱多组学yōu质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循CDE、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量tǐ系rèn证，建立了完备的质量tǐ系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报zhù册和生产放行。
1、公司采用ISO9001质量控制tǐ系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；
2、guó家CNAS实验室认可，为客户提供符合quán球药政法规的药物质量研究服务；
3、业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；
4、7大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；
5、服务3000+企业，10000+客户的选择；
6、致力于为您提供yōu质的生物质谱分析服务!