寨卡病毒IgM检测试剂盒

通用名称：寨卡病毒IgM ELISA试剂盒（捕获法）
英文名称：ZIKV DetectTM22.0  IgM Capture ELISA
产品规格：96T
产品货号：900223
产品品牌：美国Inbios

预期用途

检测原理

寨卡病毒IgM检测试剂盒组成成分
1、微孔板——12 x 8——用对人IgM特异的捕获抗体预包被。
2、阴性质控——1x50ul——用于验证实验的有效性，使用前短暂离心以去除任何的沉淀物。
3、阳性质控——1x50ul——用于验证实验的有效性，使用前短暂离心已去除任何的沉淀物。
4、样品稀释液——1x25mL——用于稀释所有的血清样本和质控品。在2-8℃储存，效期内有效。
5、即用型寨卡病毒重组抗原——1x3mL——该瓶含有包含Zika包膜糖蛋白的即用型（RTU）ZIKV抗原（Zika Ag）。
6、交叉反应质控抗原（CCA）——1x3mL——含可交叉反应的质控抗原。有助于结果解释。
7、正常质控抗原（NCA）——1x3mL——含正常质控抗原，有助于结果解释。
8、即用型二抗——1x9mL——含有靶向黄病毒抗原的二抗。
9、酶联物浓缩液（100 x）——1x150ul——含有HRP标记的抗鼠抗体，使用前充分混匀，在酶联物稀释液中稀释。
10、酶联物稀释液——1x9mL——用来稀释酶联物浓缩液。
11、洗涤浓缩液（10 x）——1x120mL
12、底物液——1x12mL——对光敏感。
13、终止液——1x9mL——用来终止反应。


寨卡病毒IgM检测试剂盒检测步骤
1、阳性质控和阴性质控针对于Zika Ag、CCA和NCA三种抗原须做双孔检测，而样品只做单孔检测即可。
2、将板条做好标记。详见“排版示例”。
3、按照标记好的微孔，每孔加入50ul相应的阳性质控、阴性质控和样品，注意避免产生气泡。
4、完成后盖上保鲜膜。
5、放在37℃（±2℃）温育箱中温育1小时（±5分钟）。注意：微孔板不能叠加放置温育，必须单独平铺进行温育，不能使用CO2或其他气体的温育箱进行温育。不能将微孔板放置在任何潮湿的物品上。
6、温育完成后，用洗板机每次每孔300ul洗涤液洗板，共洗6次。
7、按照之前的分布，使用多通道移液器每孔加入50ul的Zika Ag、CCA及NCA，详见示例排版。
8、重复步骤4
9、重复步骤5
10、重复步骤6
11、使用多通道移液器，每孔加入50ul即用型的二抗。
12、重复步骤4
13、重读步骤5（孵育时间为30min）
14、重复步骤6
15、使用酶联物稀释液1:100倍稀释酶联物，按照需要的量配制，现配现用。
16、使用多通道移液器，每孔加入50ul新鲜配制的酶联物
17、重复步骤4
18、重读步骤5（孵育时间为30min）
19、重复步骤6
20、使用多通道移液器，每孔加入75ul的TMB底物液
21、室温（20-25℃）避光温育20分钟，无需封板。
22、使用多通道移液器，每孔加入50ul的终止液，室温温育至少1分钟。30min内读取OD值，超过30min会影响实验结果。
23、450nm处酶标仪读数。注意：请勿对空白孔或空白值调零，不能使用参考波长。否则会导致CCA和NCA的值降低和不正确的ISR值。