利什曼原虫试剂盒
中文名称:利什曼原虫IgG试剂盒
英文名称:Leishmania IgG Kit
产品规格:96T
产品品牌:德国DRG
产品货号:EIA3492
利什曼原虫试剂盒预期用途
利什曼原虫试剂盒可用于人血清中抗内脏利什曼原虫IgG的筛查检测。仅用于科研使用。
利什曼原虫介绍
利什曼原虫试剂盒实验原理
利什曼原虫试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
包被板 | 96人份 | 包被了利什曼原虫抗原的微孔板(可拆卸板条) |
阳性质控 | 1瓶,装1ml | 已稀释好的利什曼原虫阳性人血清和含硫柳汞的缓冲液。 |
阴性质控 | 1瓶,装1ml | 已稀释好的利什曼原虫阴性人血清和含硫柳汞的缓冲液。 |
显色剂 | 1瓶,装11ml | TMB显色剂。 |
酶联物 | 1瓶,装11ml | 辣根过氧酶标记的抗人IgG和含硫柳汞的稳定缓冲液。 |
洗涤液 | 1瓶,装25ml | 20倍浓缩的缓冲液和含硫柳汞的表面活性剂。 |
稀释缓冲液 | 2瓶,装30ml | 含硫柳汞的蛋白缓冲液。 |
终止液 | 1瓶,装11ml | 1M的硫酸。 |
储存条件
利什曼原虫试剂盒储存于2-8℃的环境下。含洗涤液的洗涤瓶必须储存在室温下。
准备
洗涤缓冲液:打开试剂瓶,在其中加入475ml去离子水,之后将稀释好的洗涤缓冲液到入塑料挤瓶。
实验样品:用稀释缓冲液制备1:40的病人血清。
血清的采集与准备
采集全血样品,获取血清,如果样品不立即检测,可以将它冻存于-20℃或更低的温度下。不要使用热灭活血清,避免反复冻融样品。
利什曼原虫试剂盒实验步骤
1、取出实验所需数目的板条并置于板架上。
2、在微孔1中加入100ul阴性质控,微孔2中加入100ul阳性质控,剩余的孔中分别加入100ul 40倍稀释的样品。
注意:阴性质控和阳性质控都是以预先稀释好了的,不必再稀释。
3、室温温育10min。
4、弃取孔内反应液,用洗涤液洗板3次。
5、在每一微孔中加入2滴酶联物。
6、室温温育10min。
7、弃取孔内反应液,用洗涤液洗板3次。
8、在每一微孔中滴加2滴显色剂。
9、室温温育5分钟。
10、在每一微孔中滴加2滴终止液,振板以使溶液混合均匀。
11、加终止液后450nm处读取OD值(参考波长:620-650)。洗板时应该加满每个孔,弃取孔内反应液,并反复洗3次。
A、洗板时避免产生泡沫。
B、每次实验都必须包含质控品。
结果说明
分光光度计:450nm和620-650nm处读取OD值。
阳性:OD值大于或等于0.2。
阴性:OD值小于0.2。
视觉:如果反应液所显示的颜色很明显,则样品应当被视为阳性。
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