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牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒
牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒
  • 牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒

牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒

产品报价:2000元

更新时间:2019/4/17 8:08:43

地:山东

牌:landu

号:牛奶黄曲霉M1

厂商性质: 生产型,

公司名称: 山东绿都生物科技有限公司

产品关键词: 牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测   牛奶黄曲霉M1   ELISA检测   ELISA检测试剂盒   试剂盒  

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一、原理

牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品黄曲霉M1残留量。

二、适用范围

牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒定量检测生鲜奶中黄曲霉M1的残留。

、牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒特点及技术指标

*  检 测 时 间 : 30 min

  牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒灵敏度: 0.2 ppb(μg/kg)

* 牛奶黄曲霉M1(Aflatoxins M1)ELISA检测试剂盒检测纯阴性生鲜奶样本的背景值

    0.2ppb,且直接点样;

* 试剂盒提供工作浓度标准品,使用更方便。

试剂盒检测样本的回收率和准确度:

样本

回收率

生鲜奶

70%-120%

试剂盒特异性

药物名称

交叉反应率(%

黄曲霉M1

100%

黄曲霉G1

< 1%

、所需材料

仪器微孔板酶标仪450 nm/630 nm振荡器刻度移液管10 mL、天平(感量0.01 g、洗耳球、离心管(5 mL, 50 mL

微量移液器:单道 1μL10 μL10 μL100 μL

多道 50μL300 μL

试剂:去离子水

 试剂盒组成

序号

组成部分

96T装量

1

黄曲霉M1酶标板

12×8

2

黄曲霉M1标准品浓度*5

0.5-1mL

3

黄曲霉M1酶标物

7mL

4

黄曲霉M1抗体

7 mL

5

底物A

7 mL

6

底物B

7 mL

7

终 止 液

7 mL

8

20×浓缩洗涤液

40 mL

*注:5个标准品浓度为:0 ppb, 0.2 ppb, 0.6 ppb,

1.8 ppb, 5.4 ppbAB标准品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六:溶液配制

配液1: 洗涤工作液

   用去离子水将20 ×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释。配好的洗涤工作液在4 环境可保存一    个月,用前一天取出回温。

七、样本前处理                                                   

样本处理前须知:

处理完的样品应及时进行下步检测,实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时要更换吸头。

样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

  生鲜奶(稀释倍数:1

  取新鲜无变质的生奶,取适量回温后直接用于分析

 酶标免疫测定程序

① 将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回  升至室温(2025℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

②  按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。

③ 加标准品/样品、酶、抗体:加标准品/样品50μL到对应的微孔中,加入黄曲霉M1酶标物50μL /孔,再加入黄曲霉M1抗体50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37避光环境中反应20min

④  洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,

加入洗涤工作液250μL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,最后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

⑤   显色:加入底物液A50μL/孔,再加底物    

B50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37避光环境中反应10min

⑥  测定:加入终止液50μL/孔,用酶标仪立即  测定450nm处的吸光度值(建议用双波长450/630nm)检测。

结果判定

以标准品百分吸光率为纵坐标,以黄曲霉M1标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中黄曲霉M1实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)

注意事项

洗板拍干后应立即进行下一步操作

反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。

不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。

0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为1015min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20 min,反之则减短反应时间。

 未提及样本请致电本公司技术服务部。

十一贮藏条件及保存期

    贮藏条件: 28

期: 12个月

十二、问题与对策

 

序号

现象

可能原因

解决方法

1

板条不显色或者无相应数值

试剂使用顺序混乱,或操作步骤出错

严格遵循实验说明重复实验

使用了不同批次的试剂

确保试剂来自同一试剂盒

板条受潮严重

板条要封好,干燥剂失效要及时更换

 

 

 

 

2

 

 

 

OD

 

试剂过期,或者不同的批次混用

查证过期试剂和批次

洗液配制错误、洗涤浸泡时间过长

按照说明书要求洗涤,并正确配制洗液

孵育时间过短

按照说明书要求,严格计算好时间

试剂污染

确保吸取不同液体更换新的枪头和盛放器皿

试剂温度过低

根据试剂体积大小回温时间相应延长,确保试剂完全回温

使用错误波长读数,或者酶

标仪失灵

确保450nm波长读数,检查酶标仪是否故障

试剂盒处于极端的条件

使用完毕的部分请立即放回冰箱,勿置于过热环境时间太长

 

 

3

过高的

背景值或吸光度(OD值)

使用了质量差的水配制试剂

使用双蒸水或去离子水配制试剂

洗涤不当或者洗板机洗板效果不好

增加1-2洗涤,每孔至少加入250μL洗液

酶标仪失灵,如OD值读数很高而颜色很浅

使用校正微孔板检查酶标仪,检查光源

实验室温度过高,反应时间过长

测定操作温度是否合适,时间是否计算正确

试剂混淆,被污染或者配制不当

确保使用正确的试剂,准确配制,避免污染

 

4

 

板内

差异性

加入标准品和样品的时间不一致

使用多道枪加样,同种试剂加样途中不能中断

多道枪使用不当

校准多道枪检查吸嘴是否套紧,确保吸液量一致

洗涤系统出现故障

检查洗涤系统,保持良好运行

 

 

 

5

 

板与板之间孵育时间相差太大

独立计时,确保一致的孵育时间

板与板之间不一致的洗涤过程

确保相同的洗涤次数,保证洗涤系统正常运作

使用移液枪不当

检查移液枪,确保吸取相同液量

试剂和样品处于不同温度

确保盒内试剂和样品液等充分回温,如果试剂体积较大则需要回温较长时间。不能用温水浴回温样品

不同批次的试剂混用,或试剂盒过期

试剂不要混用通常0标准品的OD值小于0.5显示试剂质量下降

 

 

6

一个或多个标准品数据点出曲线范围

标准品添加顺序混乱,或者放置于错误位置

按照说明要求重复实验,保证标准品添加正确

标准品被污染或与其他标准品混淆

改用新的标准品,按照由低浓度到高浓度的顺序添加标准品

洗涤不一致或者洗涤系统失灵

遵循一如既往的洗涤方式,检查洗涤系统

加入标准品和试剂的时间不一致

由低到高浓度依次添加标准品,使用多道枪移液

多道枪使用不当

校准多道枪,检查吸嘴是否套紧,确保吸液量一致

 

 

 


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