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Qiagen AllPrep DNA/RNA Micro Kit从细胞或组织样本中同时纯化DNA和RNA
魏轶昊 : (18516292006) (021-31600940)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)魏轶昊 : (18516292006) (021-31600940)
(联系我时,请说明是在来宝网上看到的,谢谢!)Qiagen AllPrep DNA/RNA Micro Kit
从细胞或组织样本中同时纯化DNA和RNA
从同一样本中获得高品质DNA和RNA
从珍稀样本中得到大量的DNA和RNA
简短流畅的操作流程,实现快速纯化
即用型DNA和RNA,用于多种下游应用
AllPrep DNA/RNA Micro Kit可以从同一生物样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。通过新型的AllPrep DNA离心柱纯化DNA,然后AllPrep柱流出液流过RNeasy MinElute离心柱纯化得到RNA。该试剂盒最多可处理5 x 105的细胞或5 mg的组织样本。如需处理更多样本,可使用AllPrep DNA/RNA Mini Kit。
宽泛的线性范围。
使用AllPrep DNA/RNA Micro Kit从10倍梯度稀释的大鼠肾脏匀浆液中纯化基因组DNA和总RNA。在每个浓度梯度,都对两份样本进行DNA纯化,对四份样本进行RNA纯化。[A] 对Pgk1基因进行real-time PCR分析[B] 对Jun转录本进行real-time RT-PCR分析。两者都在宽泛的动态范围内显示出可靠的线性契合度,对于5 mg到50 ng的组织样本,都能进行可靠的纯化。
AllPrep DNA/RNA Micro Kit可处理培养细胞或易裂解组织(见表)。应用新型AllPrep DNA离心柱纯化基因组DNA,RNeasy MinElute离心柱纯化总RNA。通常从培养细胞中纯化所得总RNA的RIN值接近10。纯化的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,取决于匀浆情况(参见"Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA")。可在很大范围内对基因组DNA和总RNA进行可靠的定量检测(参见"Wide dynamic range")。
组织(5 mg) | DNA产量(μg)* | RNA产量(μg)* |
---|---|---|
心脏 | 3.89 | 2.00 |
大脑 | 2.60 | 3.08 |
肾 | 11.33 | 12.70 |
肝 | 32.40 | 16.02 |
肺 | 9.65 | 24.63 |
脾 | 20.50 | 43.51 |
胸腺 | 34.90 | 56.89 |
肠 | 26.71 | 27.38 |
AllPrep DNA/RNA Micro Kit用于从单个细胞或组织样本中纯化基因组DNA和总RNA,非常适合处理小样本,诸如激光显微切割的冻干切片和细针穿刺抽出液等。由于无需将样本分为两份单独进行纯化,可获得较大产量的DNA和RNA。经纯化的DNA和RNA可分别洗脱并直接用于多种下游应用。
简单的流程可在40分钟内从同一样本中纯化高品质DNA和RNA(参见"AllPrep DNA/RNA procedure")。可处理培养细胞和易裂解组织,应用新型AllPrep DNA离心柱纯化基因组DNA,RNeasy MinElute离心柱纯化总RNA。
在Buffer RLT Plus(AllPrep DNA/RNA Micro Kit中提供)中破碎并匀浆组织时,可能出现很多泡沫。可在开始破碎和匀浆前,在Buffer RLT Plus加入Reagent DX(单独订购),终浓度为0.5%(v/v),即可有效消除泡沫。Reagent DX已经过精密测试,对于RNA纯度和诸如real-time RT-PCR等下游应用没有影响。添加了Reagent DX的Buffer RLT Plus可在室温(15–25oC)下至少保存9个月。
另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得的蛋白是变性的,可用于诸如SDS-PAGE、Western印迹和2D凝胶电泳等应用。对于更大样品量的实验,可使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit从细胞或组织样品中同时纯化DNA、RNA和蛋白。
纯化的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,取决于匀浆情况,适合多种应用,包括:Southern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、DNA甲基化分析、PCR和多重PCR。
经纯化的总RNA可即用于多种应用,包括:RT?PCR和real?time RT?PCR、差异显示、cDNA合成、Northern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、微阵列分析。
另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得的蛋白是变性的,可用于以下应用:SDS?PAGE、Western印迹和2D凝胶电泳。