产品名称:PureCube Hydrophobic Interaction Agaroses(PureCube疏水层析琼脂糖)
德国生产商介绍:
德国Cube Biotech是一家专注于蛋白纯化产品的生产商和服务商,尤其擅长于蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验致力于膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究。在生物医学研究相关的人体膜蛋白等方面,如:作用于转运蛋白或G蛋白偶联受体(GPCRs)等蛋白的药物设计开发建立在对靶蛋白结构及功能的研究之上,而相关研究也依托于研究蛋白及膜蛋白生物化学和有机化学等多方面技术实力。Cube Biotech将专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列产品产业化,现已与全球多家高校实验室、科研机构、制药企业成为紧密的长期合作伙伴,推进了欧美膜蛋白研究以及生物制药的进展。德国Cube Biotech系列产品应用已刊登在《美国化学会-应用材料与界面》(ACS Applied Materials & Interfaces)等期刊,并且PureCube Rho1D4琼脂糖产品应用已被Springer旗下Human Press出版社出版的Methods in Molecular Biology Series(分子生物学方法系列实验指南丛书)所采用。
产品简介:
疏水吸附色谱法是蛋白纯化分离是很常用的方法之一,该方法利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离蛋白,此方法不需要在蛋白上添加任何亲和标签,所以同时适用于重组蛋白和天然蛋白的纯化。Cube Biotech研制的疏水琼脂糖表面链接的疏水基团有丁基、辛基和苯基,各基团针对不同目的蛋白和使用环境要求不同。通过蛋白质的疏水差异,带有疏水基团的蛋白质会与疏水配基相结合,利用此种性质可以将蛋白质进行分离。新纯化一个蛋白时,强烈推荐尝试不同的基质,为此Cube Biotech提供了包含少量各型基质的疏水层析筛选套装PureCube HIC Starter Set (10 ml Butyl, Phenyl, Octyl Agarose each)。Cube Biotech为您提供德国高质量的PureCube疏水层析琼脂糖有着最大的结合能力,其结果有着最高的可重复性,尤其在用于FPLC色谱时。
产品优势:
1) 德国制造,欧美领先蛋白纯化产品供应商;
2) 更高的配体密度,以获得高蛋白产量,特别是在用于纯化较小的蛋白质时;
3) 多种可选的基质:苯基、辛基和丁基琼脂糖;
4) 均一的40 μm孔径交联琼脂糖基底;
5) 提供起始疏水层析筛选套装;
6) 非常适合用于“Ion Exchange Agaroses”(离子交换琼脂糖)纯化后的后续纯化。
疏水相互作用(HIC)
HIC分离基于蛋白的疏水区域与层析介质的相互作用,该介质包含苯基、丁基或叔丁基作为疏水基团。这种相互作用在高离子强度时更强,所以HIC非常适合硫酸铵沉淀或离子交换纯化中高盐洗脱缓冲液的进一步纯化。
结合
高盐浓度时,蛋白可能发生沉淀,所以我们推荐先在结合所需盐浓度下做小样实验,检测目标蛋白是否仍处于溶解状态。
洗脱
结合的蛋白可以用低盐缓冲液洗脱。我们强烈推荐尝试一系列盐浓度梯度(比如硫酸铵或氯化钠),以确保该蛋白在理想的盐浓度下能保持稳定。
图1:疏水相互作用基质中不同功能基团的化学结构
使用哪种基质来纯化我的蛋白?
预测蛋白的总体疏水性,比预测蛋白的等电点更难,因为蛋白表面只有分离的少量位点是疏水的,但它们却可能足以与HIC基质发生足够强的相互作用。所以,我们推荐尝试不同的凝胶,测试其在保持蛋白可溶性所需盐浓度下是否能有效结合目标蛋白,并且在能有效纯化目标蛋白所需盐浓度下,保持目标蛋白稳定性和活性。Cube Biotech提供的PureCure HIC Starter Set疏水层析筛选套装,其中包含三种不同疏水配基的凝胶,以便找出最适合目的蛋白的产品和反应条件。
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图2:使用PureCube苯基琼脂糖及某一国际领先的竞争产品纯化两种测试蛋白。对较大的测试蛋白(BSA,66 kDa),两种HIC树脂的回收率均为约25mg/ml;而对较小的测试蛋白(溶菌酶,14 kDa),PureCube基质的回收率约为竞争产品的约4倍(PureCube:45mg/ml;竞争产品:11mg/ml)。纯化操作于同批次平行完成,结合缓冲液为1.5 M硫酸铵、100 mM NaH2PO4(pH7.0),洗脱缓冲液为100 mM NaH2PO4(pH7.0)。
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订货信息:
39005 | PureCube Butyl Agarose (50 ml) |
39010 | PureCube Butyl Agarose (250 ml) |
39012 | PureCube Butyl Agarose (500 ml) |
39105 | PureCube Phenyl Agarose (50 ml) |
39110 | PureCube Phenyl Agarose (250 ml) |
39112 | PureCube Phenyl Agarose (500 ml) |
39205 | PureCube Octyl Agarose (50 ml) |
39210 | PureCube Octyl Agarose (250 ml) |
39212 | PureCube Octyl Agarose (500 ml) |
39099 | HIC Starter Set初始疏水层析筛选套装 (10 ml Butyl, Phenyl, Octyl Agarose each) |