BioTNT mRNA QPCR 实验相关产品订购指南:
一、RNA 抽提:
经验证,可以使用以下产品进行样品RNA 抽提, RNA抽提质量符合QPCR Array实验样本质量要求:
品名 | 货号 | 产品分类 | 品牌 | 规格 |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0401 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0402 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 100T |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0403 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 200T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(组织/细胞) | A2040A103 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(血液,体液) | A2040A104 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(酵母细胞) | A2040A105 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
RNeasy Mini Kit(50) | 74104 | RNA 抽提 | Qiagen | 50T |
RNase-Free DNase Set (50) | 79254 | RNA 抽提 | Qiagen | 50T |
请根据您的样本选择抽提试剂盒;无论您是否采用bioTNT 提供的抽提试剂盒,建议您在进行逆转录和QPCR实验前进行RNA 和CDNA 样品质量验证;验证方式见附录;
二、逆转录实验:
品名 | 货号 | 产品分类 | 品牌 | 规格 |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0401 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0402 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 100T |
TRIZol? RNA提取试剂盒(组织、细胞) | A2010A0403 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 200T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(组织/细胞) | A2040A103 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(血液,体液) | A2040A104 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
磁珠法RNA抽提试剂盒(酵母细胞) | A2040A105 | qPCR kits/RNA 抽提 | BioTNT | 50T |
RNeasy Mini Kit(50) | 74104 | RNA 抽提 | Qiagen | 50T |
RNase-Free DNase Set (50) | 79254 | RNA 抽提 | Qiagen | 50T |
根据您的样品数量,选择逆转录试剂盒的规格;可以在RNA 验证合格后先小批量逆转录样本,并进行样本质量验证;质量合格后进行QPCR实验;
三、QPCR :
BioTNT 为您提供QPCR 相关的所有试剂:
品名 | 货号 | 产品分类 | 品牌 | 规格 |
Realtime PCR PreMIX(染料法) | A2010A001 | qPCR kits | BioTNT | 1ml |
BioTNT 为您提供Preci? mRNA qPCR 引物对:提供包括human mRNA(30000+ )检测,rat mRNA(50000+),mouse mRNA(30000+)经验证可用于QPCR实验的PCR 引物对;提供可用于均一化检测的内参基因QPCR 引物对(beta actin,GAPDH, 18SRNA等);
您可以根据您要定制的mRNA 引物数量,选择相应包装,为您节省科研费用:
货号 | 包装 | 价格(250tests) | 价格(500tests) |
PRIM123456 | 1对mRNA引物 | ¥299 | ¥399 |
PRIM123456B1 | 1对mRNA引物、1ml premix(A2010A001) | ¥549 | ¥649 |
PRIM123456B5 | 1对mRNA引物、5ml premix(A2010A001) | ¥1,469 | ¥1,569 |
PRIM123456B10 | 1对mRNA引物、10ml premix(A2010A001) | ¥2,399 | ¥2,499 |
PRIM123456C | 1对mRNA引物、1对内参 | ¥369 | ¥469 |
PRIM123456C1 | 1对mRNA引物、1对内参和1ml premix(A2010A001) | ¥619 | ¥719 |
PRIM123456C5 | 1对mRNA引物、1对内参和5ml premix(A2010A001) | ¥1,519 | ¥1,619 |
PRIM123456C10 | 1对mRNA引物、1对内参和10ml premix(A2010A001) | ¥2,449 | ¥2,549 |
PRIM5 | 5对mRNA引物 | ¥1,299 | ¥1,799 |
PRIM5B1 | 5对mRNA引物、1ml premix(A2010A001) | ¥1,549 | ¥2,049 |
PRIM5B5 | 5对mRNA引物、5ml premix(A2010A001) | ¥2,469 | ¥2,969 |
PRIM5B10 | 5对mRNA引物、10ml premix(A2010A001) | ¥3,399 | ¥3,899 |
PRIM5C | 5对mRNA引物、1对内参 | ¥1,369 | ¥1,869 |
PRIM5C1 | 5对mRNA引物、1对内参和1ml premix(A2010A001) | ¥1,619 | ¥2,119 |
PRIM5C5 | 5对mRNA引物、1对内参和5ml premix(A2010A001) | ¥2,519 | ¥3,019 |
PRIM5C10 | 5对mRNA引物、1对内参和10ml premix(A2010A001) | ¥3,449 | ¥3,949 |
PRIM10 | 10对mRNA引物 | ¥2,299 | ¥3,299 |
PRIM10B1 | 10对mRNA引物、1ml premix(A2010A001) | ¥2,549 | ¥3,549 |
PRIM10B5 | 10对mRNA引物、5ml premix(A2010A001) | ¥3,469 | ¥4,469 |
PRIM10B10 | 10对mRNA引物、10ml premix(A2010A001) | ¥4,399 | ¥5,399 |
PRIM10C | 10对mRNA引物、1对内参 | ¥2,369 | ¥3,369 |
PRIM10C1 | 10对mRNA引物、1对内参和1ml premix(A2010A001) | ¥2,619 | ¥3,619 |
PRIM10C5 | 10对mRNA引物、1对内参和5ml premix(A2010A001) | ¥3,519 | ¥4,519 |
PRIM10C10 | 10对mRNA引物、1对内参和10ml premix(A2010A001) | ¥4,449 | ¥5,449 |
附件:
样品质量验证:
为了保证PCR Array实验的质量,建议在使用前先进行样本质量验证;
RNA 定量与质量控制
A.使用无菌水(RNase-free)稀释 RNA 样本,检测 260 nm 和 280 nm 吸光值,A260/280 应大于 1.8。
B.使用公式A260× 40 ×稀释倍数 = XXXXμg/mL 计算 RNA 浓度。
C.使用琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 完整性。
D.建议:RNA质量测定后,逆转录得到cDNA,建议用多个内参基因自行验证cDNA质量;
推荐购买BioTNT的样本质量验证引物套装,可以在进行qPCR 之前对样本进行验证(包含内参引物,如human beta actin, GAPDH, 18sRNA等)
E.基因组DNA污染控制
每个Array板块上的GDC(Genomic DNA Control)反应孔专为检测每个样品进行qPCR反应时可能存在的基因组DNA污染而设置。如果该反应孔的CT值小于35,则表明存在可检测到的基因组DNA污染,应采取措施予以解决。因此,必须从RNA样品中去除基因组和其他全部残余污染物。建议抽提时加入DNAse去除基因组污染。
建议在进行PCR Array 之前购买BioTNT 样本质量验证引物套装或者单独的GDC引物进行基因组DNA 污染控制的质量验证;验证结果CT 值如果小于35,则表明存在可检测到的基因组DNA污染,应采取措施予以解决。
抽提时推荐的配套磁力架:
BioTNT 提供以下各种规格的磁力架产品,可以用于核酸抽提如DNA 抽提,RNA 抽提的磁珠法试剂盒;可以作为IP实验,COIP 实验,CHIP 实验的磁珠法试剂盒的配套小设备;
磁珠(Mag Beads)的分离效果,一般强于琼脂糖珠子(Agorose beads)。
如不购买磁力架,BioTNT 磁珠法抽提试剂盒,也可以用离心机进行实验操作。
品名 | 货号 | 规格 |
8孔磁力架 | B2010A2008-1 | 1.5ml/2ml |
16孔磁力架 | B2010A20016-1 | 1.5ml/2ml |
多功能磁力架 | B2010A2001-1 | 200ul,1.5ml,15ml |
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