本制品向PCR体系中添加了荧光探针(TaqMan或Molecular Beacon等),在扩增过程中,荧光量与扩增产物量成正比,因此可通过荧光量来测定样品核酸量。本制品以RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后再以合成的cDNA为模板,继续用基因特异性引物扩增,并用荧光探针进行检测。在同一反应体系中可完成从反转录到qPCR的全部过程。
本制品采用的酶是HotStart Taq,并结合了特别的缓冲液体系,能有效抑制非特异性反应,在更广的范围内对核酸含量进行准确定量。
本制品配有不同浓度的ROX Reference Dye,用于不同仪器校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
高特异性:采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性。
高效:Novoprotein精心配制的RealTime PCR专用试剂,具有更高扩增效率和灵敏度。
请将体系上下颠倒混匀,动作轻柔,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头及Microtube等,尽量避免污染。
用ROX Reference Dye I校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus;其他仪器。用ROX Reference Dye II校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 7500/7500 Fast;Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P;其他仪器。
不需要用ROX Reference Dye校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/ iQ /My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon /Chromo4;Eppendorf MasterCycler realplex/ realplex 2s。Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;Roche Applied Science LightCycler 480;Thermo Scientific PikoReal Cycler;Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/ Rotor-Gene 6000;其他仪器。