HumanDiI-High Density Lipoprotein, (Human DiI-HDL)
红色荧光标记人源高密度脂蛋白
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
Human DiI-High Density Lipoprotein, (Human DiI-HDL)红色荧光标记人源高密度脂蛋白 | 20611ES76 | 500μg | 4oC避光 | 1758.00 |
产品描述
脂蛋白在人体中主要起到运输脂质(如胆固醇、脂质、甘油三酯)的作用,按照分子量大小,主要分为以下几种(从高到低):乳糜(CM)、极低密度脂蛋白 (VLDL)、中间密度脂蛋白 (IDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等。其中HDL是密度最高的脂蛋白,不像其他大分子脂蛋白,主要将脂质运输到细胞,HDL是将脂质运出细胞,因此,高密度脂蛋白具有清除血管内多余血脂、清除血垢、清洁血管、维持细胞内胆固醇量的相对衡定的作用,从而限制动脉粥样硬化的发生发展,起到抗动脉粥样硬化作用。
本品Human DiI-High Density Lipoprotein为荧光探针DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)标记的高密度脂蛋白,可以用来观察培养细胞的HDL结合位点,或筛选HDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。
翊圣提供的HumanDiI-HDL为无菌包装,可以直接稀释使用。除提供DiI-HDL,我们还提供不带标记的HDL,I125标记的HDL。
制备方法
纯化的人健康血浆来源的HDL直接标记上DiI荧光探针,然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物,并滤膜过滤除菌。纯化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
产品性质
浓度(Concentration) | 0.8-3.0 mg/ml |
外观(Appearance) | 乳状液体 |
吸光度比例(Absorbance Ratio) | DiI/Protein=555nm/275nm=1.4 |
缓冲液组分(Buffer Components) | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
运输与保存方法
冰袋运输;
4oC无菌避光,收到货后可稳定保存6周。千万不可冻存!使用时一定要无菌操作!
注意事项
1)本品的稀释工作液极不稳定,建议即配即用;
2)长期贮存可能会有沉淀析出,属于正常现象,低速离心2 min去除沉淀即可使用;
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
1)无菌条件下,将DiI-HDL用细胞培养基稀释至10-30 μg/ml。
2)加入活细胞内,37℃培养4-5小时。
3)孵育结束,吸去含有Human DiI-HDL的培养基,并用无探针的培养基洗几次。
4)根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
a) 荧光显微镜观察
采用标准的罗丹明激发:发射滤光片(或建议使用波长为:Ex/Em=549nm/565nm);若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因DiI易溶于有机溶剂。【注】:需设阳性细胞以做对照。
b)细胞分选(流式细胞术)
胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液,选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照,从而进行流式分选设门(gate)。(建议使用波长为Ex:514/549nm; Em: 565nm)。
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