产品报价：1050元
更新时间：2014/11/27 13:45:59
产地：美国
品牌：HYQ
型号：HG405
厂商性质： 生产型,
公司名称： 苏州胜创生物科技有限公司
胡先生 : (13382194023) (4006400850)
（联系我时，请说明是在来宝网上看到的，谢谢！）本品提供了一种快速、稳定的方法，可以从细胞、动物组织、细菌和真菌、血液、植物等样品中快速提取RNA，在20-30 min内即可完成小量提取。只有微量的基因组DNA存在于纯化的RNA中，必要时可以通过DNase I消除。HYQspinTM总RNA试剂盒可直接用于RT-PCR、Northern杂交，cDNA文库构建等应用。
货号 | 规格 | 价格 |
HG405-01 | 5次 | 点击申请试用装 |
HG405-02 | 50次 | 1050元 |
HG405-03 | 250次 | 4200元 |
http://www.hyqbio.com.cn/index.php?case=archive&act=show&aid=36
操作步骤：
使用前计算10 x Red Blood Cell Lysis Buffer 的用量，.然后用9倍体积的ddH2O稀释。
1.在合适的RNase free的离心管中加入1倍体积的人全血细胞和 5 倍稀释的 Red Cell Lysis Buffer ，颠倒混匀。
*加入适量的血样，健康血样（一般4000–7000白细胞/μL ）不要超过1.5 mL ，若白细胞数量多，适量减少血样处理量。
2.冰上静置10–15 分钟，静置期间涡旋2次混匀。
浑浊的悬浮液变得澄清说明红细胞裂解完全，否则冰上静置时间增加到20分钟。
3.4°C离心机3000rpm离心10分钟, 完全移除上清。
离心后管底形成白色细胞团沉淀， 确保完全移除上清，细胞团有少量红色，说明有红细胞残留，在洗涤步骤可以除去，如果看到大部分的红色细胞团，再加1 mL Red Cell Lysis Buffer冰上静置5-10分钟。
4.加入等体积的Red Cell Lysis Buffer (Red Cell Lysis Buffer 的体积=步骤1中血样的体积)，涡旋重悬细胞。
5.4°C离心机3000rpm离心10分钟, 完全移除上清。
6.加入500 μL Buffer RY ，最大速度涡旋2分钟。
*确定Buffer RY的用量，使用前每毫升Buffer RY中加入20 μL2-mercaptoethanol (2-ME) ， 含有2-ME的Buffer RY 室温可以储存1个月。
7.加入1倍体积的70% 乙醇，(例如: 500 μL 70% 乙醇= 500 μL 裂解液)。
8.将加入无水乙醇的混合液转移到RNA吸附柱，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
9.加入500 μL Buffer R2，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
10.加入500 μL Buffer RWS（确保已加入无水乙醇），室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
11.再次加入600 μL Buffer RWS，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
12.12,000 rpm离心5 min，除去吸附柱上残留的乙醇。
*此步骤中开盖离心将会更有效的去除残留的乙醇。
13. 将吸附柱转移到一个无RNA酶的1.5 mL离心管中，加入30-50 μL DEPC-treated ddH2O，室温静置1分钟，12,000 rpm离心1min洗脱RNA。
*洗脱下来的RNA保存于-20℃。
