伏马毒素
伏马毒素(B1, B2,和B3)是由镰孢菌(霉)属念珠菌产生的真菌毒素。在世界范围内都发现了伏马毒素污染玉米的现象。研究表明伏马毒素可以诱发老鼠患肝癌,猪的肺水肿和马的脑脊髓白质病。在一些地区中玉米中伏马毒素含量很高,在这些地区(比如中国和非洲)人的食道癌具有高发性。
适用
伏马毒素试剂盒原理是竞争酶联免疫反应,用于检测玉米中的伏马毒素。
原理
这个REAGEN 伏马素素检测试剂盒的原理是固相直接竞争酶联免疫反应。聚苯乙烯微孔板中包被伏马毒素的特异性抗体,这种抗体和伏马毒素的各个亚型都有很好的交叉反应。利用90%的甲醇从样品中提取伏马毒素,把提取的样品和HRP(辣根过氧化物酶)标记的伏马毒素混匀并加入对应的孔检测。酶标记毒素与标准品或样品中的伏马毒素竞争与包被在微孔底部的抗体结合。孵育一段时间后,倒出孔里的液体,清洗除去没有反应的物质后加入显色底物(TMB),在酶的作用下孔里将会出现蓝色。显色颜色的深浅与结合物的量成正比例的关系,与标准品或样品中伏马毒素的量成反比例关系。所以,标准品或样品中的伏马毒素浓度越高,显色的蓝色将会越浅。加入酸,终止反应,底物颜色由蓝色变为棕黄色。微孔板放进酶标仪里,在OD450nm读取吸光度值。样品的吸光度值与试剂盒中标准OD值相比较,相对应得出结果。
试剂盒组成
1×小袋 |
抗体包被的微孔板 |
96孔板(12×8微孔板、包被用鼠源伏马毒素单克隆抗体) |
1板 |
预混板(绿色) |
96孔板(12×8)没有包被抗体 |
6×小瓶 |
伏马毒素标准品 |
1.5mL/瓶,伏马毒素的浓度分别为2.5, 7.5, 20.0, 50.0, 150.0 ng/mL |
2×小瓶 |
HRP-伏马毒素偶联物 |
2 x 12mL HRP-伏马毒素添加防腐剂的缓冲溶液 |
1×小瓶 |
底物试剂 |
15mL TMB, |
1×小瓶 |
终止液 |
15mL 酸性液体 |
1×小袋 |
洗涤缓冲液 |
0.05%的PBS-Tween20 加入1L蒸馏水 |