Taq Plus DNA聚合酶（250U）

TaqPlus DNA聚合酶

注：1 所有产品包装中均提供6×Loading Buffer。

        2 *标识制品中附带dNTPs

产品组分

P1031

Taq Plus DNA聚合酶  2.5 U/μl      100 μl

10×Tpol Buffer（Mg²⁺ Plus）      1.25 ml

6×Loading Buffer                            1 ml

P 1032

Taq Plus DNA聚合酶  2.5 U/μl       100 μl

10×Tpol Buffer（Mg²⁺ Plus）      1.25 ml

dNTPs（各2.5 mM）                      1 ml

6×Loading Buffer                            1 ml

P1033

TaqPlus DNA聚合酶  2.5 U/μl      400 μl l

10×Tpol Buffer（Mg²⁺ Plus）  1.25 ml×2

6×Loading Buffer                            1 ml

P1034

Taq Plus DNA聚合酶  2.5 U/μl      400 μl

10×Tpol Buffer（Mg²⁺ Plus）  1.25 ml×2

dNTPs（各2.5 mM）                      1 ml×2

6×Loading Buffer                            1 ml

注：  10×PCR Buffer分为Mg²⁺ Plus与Mg²⁺ Free两种包装，可方便选择。如没特别说明提供10×PCR Buffer（Mg²⁺ Plus）。Mg²⁺ Free的10×PCR Buffer提供25 mM MgCl₂。

保存条件

  -20℃保存2年。多次冻融不影响生物学活性。

产品说明

Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍，扩增片段的长度可达20 kb（简单模板）。在扩

增复杂模板（如GC-rich或重复序列）时，Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶，可用于复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端：平末端

与3’-dA。

产品特点

• 复杂模板扩增：如含有GC-rich或重复序列的模板。
• 保真性好：保真性是Taq DNA聚合酶的4倍。
• 长片段扩增：扩增片段的长度可达20 kb。

Taq Plus DNA聚合酶（250U）

产品用途

• 复杂模板PCR扩增

活性定义

    一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制

    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，

扩增活性无明显改变。

10×PCR Buffer

  500 mM KCl

  100 mM Tris-Cl

  15 mM MgCl2

  1% Triton-100

酶贮存液

  20 mM Tris-HCl

  1 mM DTT

  0.1 mM EDTA

  100 mM KCl

  0.5 %TW 20

  0.5 % NP 40

  50 % Glycerol

应用举例

注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

以λ DNA为模板，扩增1 kb片段。

λ DNA（2.5 ng/μl）　　　　　　　　    1 μl

引物1（10 μM） 　　　　　　 　　　 2 μl

引物2 （10 μM）　　　　　　    　　　2 μl

10×PCR Buffer   　　　　　　                5 μl

dNTPs（2.5 mM/L）           　         　    4 μl

Taq Plus DNA聚合酶（2.5 U/μl）     0.5-1 μl

超纯水       　　　　　　       　 补足至50 μl

PCR反应条件

94℃           3 min

94℃           30 sec

55~68℃     30 sec    〕30 Cycles

72℃           2-5 min

72℃           10 min

注意事项

1  Taq Plus DNA聚合酶的扩增产物有两种末端：平末端和3’-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。

2  建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

3  模板DNA推荐用量（50 μl PCR体系）

    人类基因组DNA       0.1 – 1 μg

    λDNA                 0.5 – 5 ng

    质粒DNA             0.1 – 10 ng

    大肠杆菌DNA         10 – 100 ng

Q&A

问：Taq Plus DNA聚合酶可扩增多长片段？

答：对于简单模板，可扩增20 kb以下片段。如扩增长片段有困难，建议选择Long Taq Mix。

问：TaqPlus DNA聚合酶的扩增产物有几种末端？

答：有两种末端，平末端和3’-dA突出末端，以平末端产物为主。这是由于Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的特定比例混合物。要提高TA

克隆效率，建议对PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆