HS PCR Mix（40次）

本产品可以通过QQ或者电话沟通询问，可以免费提供试用装与技术服务，解决您的后顾之忧。
HS^TM Mix

产品组分

P2011

2×HS^TM Mix                1ml    1支

超纯水                         1ml    1支

P2012

2×HS^TM Mix            1ml    1支×5

超纯水                    1ml    1支×5

注： 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。

保存条件

-20℃保存2年。

请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。

产品说明

HS^TM Mix是2×浓缩的高特异性PCR预混和溶液，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需在

扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染（加样次数减少）。HS^TM Mix的反应体系经特殊优化，减少引物二

聚体的形成，显著提高PCR扩增的特异性。同时，由于体系内含有增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有3’-dA突出端。

Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶，分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb（简单模板）。延伸速度为0.9-1.2 kb/ min

（70-75 ℃）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无3’→5’外切酶活性。

产品特点

• 高特异性
• 使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
• 快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
• 可重复：降低污染和加样错误风险

HS PCR Mix（40次）

产品用途

• 高特异性PCR检测
• 高通量PCR检测
• 高重复性PCR检测
• 制备TA克隆用的PCR产物

活性定义

一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，

扩增活性无明显改变。

2×HS Mix的组分

50 mM KCl

20 mM Tris-Cl

3 mM MgSO₄

400 mM dNTP混合物

0.1 U/μlTaq DNA聚合酶

溴酚蓝等

应用举例

注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

以λDNA为模板，扩增1kb片段。

λ DNA（2.5 ng/μl）                 1μl

Primer 1（10μM ）                  2μl

Primer 2（10μM）                   2μl

2×HS^TM TaqMix                     25μl

dd H₂O                        补足至50μl

反应条件

95℃           3 min

95℃          30 sec

55~68℃     30 sec    30 Cycles

72℃          1 min

72℃         10 min

备注：

1  Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物的3'末端通常会加上1个多余的脱氧腺嘌呤核苷。

2  建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

3  模板DNA推荐用量（50 μl PCR反应体系）

人类基因组DNA       0.1 μg ---1 μg

λDNA                      0.5 ng---5 ng

质粒DNA                  0.1ng-10 ng

大肠杆菌DNA         10 ng-100 ng

4 HS^TM Mix的扩增产物经纯化后可直接用于测序反应。

Q&A

问：为什么HS^TM Mix的特异性会高于PCR Mix？

答：这是由于东盛对HS^TM Mix反应缓冲液中的离子浓度等因素进行了优化。PCR引物在不同的离子浓度条件，与模板的结合能力差异显著。经过优化，

HS^TM Mix能够显著提高引物与模板结合的严谨性，从而提高PCR扩增的特异性，降低背景。在少数情况下，HS^TM Mix的扩增效率可能低于PCR Mix。

问：HS^TM Mix的扩增产物能否直接进行TA克隆？

答：直接进行TA克隆。