人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒  96T/48T

ELISA试剂盒技术流程:
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

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4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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注意事项：

1. 试验中使用特定试剂盒的标准品和抗体，不建议不同试剂盒产品调换，因为可能影响结果准确性。

2. 稀释用的缓冲液中不能含有叠氮化钠，因为其可以灭活辣根过氧化物酶。

3. 储存或孵育时避开强光。

4. 注意人员防护，避免试剂接触皮肤。

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒

5. 底物溶液避免接触氧化剂和金属。

6. 底物使用前请平衡至室温。

7. 缓冲液稀释后有效期为一个月，放大液现用现配（配好立即加到板子中）。

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储存和稳定性说明

1. 试剂盒提供冻结的标准品，对照干粉和平板，收到后请存于4~8度冰箱，有效期见标签。

2. 重复使用试剂请避免污染。

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样品及收集注意事项

1. 本试剂盒适用血清和细胞培养上清。

2. 取血清时注意凝结后立即取出血清冻存于-20摄氏度一下，避免IFN-gamma活性降低。

3. 样品出现沉淀请离心去除，避免影响实验结果。

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒  96T/48T

4. 严重溶血或高血脂样品不能使用。

5. 避免样品反复冻融，使用前平衡至室温，小心混匀。