P4SPR获取信息
P4SPR检测对象
P4SPR特点和优势
P4SPR入射光无需穿过样品:即使是血液、细胞粗提液等复杂不透明样本也可以检测。
4通道微流体可灵活组合:3+1、2 x 2或1 x 4模式,通过参比通道提高数据的准确度和重复性。
P4SPR数据的变异系数小于2.2%,保证了数据的重复性。
P4SPR采用光学设计使设备更加紧凑和坚固,易于携带和维护。
P4SPR易于操作:培训10 min即可独立实验。
芯片价格低,可重复使用,降低使用成本。
P4SPR可与其它分析技术(HPLC、MS等)整合。
P4SPR应用案例:蛋白与小分子结合
CD36跨膜蛋白胞外区可以直接结合信息素小分子。
信息素是一类分子量在100-500 Da之间的小分子化合物。
CD36胞外区蛋白通过His Tag固定到SPR芯片上,注入不同的信息素分子即可测定两者的亲和力。
使用一张SPR芯片测定了9种不同的信息素分子,获得了从0.64-106 μM的不同亲和力数据。
P4SPR应用案例:蛋白与核酸结合
P4SPR应用案例:环境检测
乳糖操纵子(LacO)是存在于大肠杆菌基因组中的一段DNA序列,负责调控大肠杆菌中的乳糖代谢。DNA结合蛋白(LacI)是控制乳糖操纵子的关键乳糖阻遏物。
硫醇化的LacO DNA固定到金薄膜芯片上,依次注入不同浓度(5,20,50,100和200 nM)的LacI蛋白,获得结合曲线,计算得到亲和力为6.4±1.2 nM。符合基于LacI的转录抑制蛋白的文献报道值。
成功地展出乳糖操纵子DNA与其阻遏蛋白的结合相互作用;P4SPR系统也可考察其他生物系统,如DNA-DNA,RNA以及适体对,可以帮助科研人员更好地了解结合并揭示生物通路中的功能。
P4SPR应用案例:蛋白与蛋白结合
EB病毒诱导基因3(EBI3)是复合细胞因子IL-27和IL-35的组成部分之一。
EBI3基因编码表达一个34 kDa的可溶蛋白,通过介导IL-6的trans-signaling功能发挥作用。
EBI3可以与IL-6发生直接相互作用。
将EBI3固化到金薄膜芯片上,注入IL-6蛋白时,检测到了3.5 nm的SPR信号变化;注入IL-11对照蛋白时,仅检测到0.8 nm的背景SPR信号变化。由此证明EBI3蛋白与IL-6蛋白可以发生直接相互作用。
通过注入不同浓度的IL-6蛋白,获得EBI3和IL-6结合曲线,测定出亲和力为4.1 μM。
RDX是一种军用高能zhayao,在军事设施和试验场附近会存在RDX残留,对附近水源造成污染。因此需要开发一种简单、快速检测RDX污染的方法。传统基于HPLC的检测方法需要使用复杂的仪器设备。
P4SPR可以检测出浓度低至1 pM的RDX污染,达到了与HPLC相同的检测灵敏度。
P4SPR体积轻巧,可随身携带,可以使用USB供电,非常适合复杂条件下的现场环境检测。
P4SPR性能参数