UM3000ELSD检测未衍生20种氨基酸的检测方法

• 高效液相色谱-UM3000蒸发光散射检测器联用检测未衍生氨基酸
  1.试剂与材料
  1.1甲醇：色谱纯
  1.2七氟丁酸：纯度≥98%
  1.3三氟乙酸：纯度≥99%
  1.40.2% 七氟丁酸（含0.1% TFA）溶液：精密吸取七氟丁酸1.00 mL，三氟乙酸0.50 mL溶于500 mL水，即得。
  1.5 标准品：甘氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、丙氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、脯氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、精氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸，纯度均大于等于98%。标准储备液
  2.样品制备
  精确吸取一定量氨基酸样品溶液，精确至0.001 mL，用水定容，使其中各氨基酸浓度范围在30 μg/mL~300 μg/mL之间。取5 mL经0.22 μm水系滤膜过滤后待测。
  3.高效液相色谱测定
  10.1 推荐色谱条件
  a)色谱柱：PrevailTM-C18，5 μm，4.6 mm×250 mm（或相当型号色谱柱）
  b)流动相：溶剂A，七氟丁酸：三氟乙酸：水=1.0：0.5：500；溶剂B，甲醇
  c)梯度洗脱：梯度条件见表1
  d)流速：0.8 mL/min
  e)室温：常温（25℃）
  f)柱温：35 ℃
  g)漂移温度：40 ℃
  h)载气流量：2.5 L/min（推荐使用氮气）
  i)进样体积：10 μL
   

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