细胞周期的DNA检测
- 来宝网2007年10月25日 10:22 点击：1777
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品
A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞）
B、组织培养细胞
C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞
Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液
柠檬酸三钠 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸馏水 250ml
我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失
Ⅲ、染色
1、 每一个管子中放入1×106个细胞；
2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液，并且不要打碎沉淀块；
3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中，并混匀；
4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。
注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。
（来源： 来宝网 ）
A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞）
B、组织培养细胞
C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞
Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液
柠檬酸三钠 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸馏水 250ml
我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失
Ⅲ、染色
1、 每一个管子中放入1×106个细胞；
2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液，并且不要打碎沉淀块；
3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中，并混匀；
4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。
注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。
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