优宁维教您常见细胞增殖检测方法
- 上海优宁维生物科技有限公司2015年10月10日 11:25 点击：1560
细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老或死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
一、MTT
又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。
产品订购信息：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
| 4890-025-K | MTT Cell Proliferation/Viability Assay | 2500tests |
| K299-1000 | MTT Cell Proliferation Assay Kit (Colorimetric | 1000tests |
二、CCK-8
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
CCK-8的原理跟MTT其实是相同的，不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT；对细胞毒性小；为1瓶溶液，不需预制，即开即用。
产品订购信息：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
| CK04-500 | Cell Counting Kit-8 | 500tests |
| CK04-100 | Cell Counting Kit-8 | 100tests |
三、BrdU
Brdu，即5-Bromo-2’-Deoxyuridine,中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷，为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体，ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。
但由于抗体分子量大，难于掺入并被有效检测，因此BrdU检测需采用DNA酶或HCl或加热使DNA变性；这些处理方法会破坏抗原识别位点，此外许多细胞周期分析的染料都需要dsDNA，这种处理方法也使得同一样本无法同时进行细胞周期分析。对于植物细胞等有细胞壁的分析，采用抗体检测还需要消化细胞壁，细胞壁消化酶常含有一些杂质，会导致检测的可靠性降低，同时BrdU检测则需要进行长时间的孵育--几个小时甚至过夜。
产品订购信息：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
| 559619 | FITC BrdU Flow Kit | 50tests |
| 552598 | APC BrdU Flow Kit | 50tests |
| K306-200 | BrdU Cell Proliferation Assay Kit | 200tests |
四、EdU
EdU（5-Ethynyl-2’- deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo?荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。
与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。
其他增殖检测订购信息：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
| K305-1000 | EZViable™ Calcein AM Cell Viability Assay Kit (Fluorometric) | 1000tests |
| K300-500 | MTS Cell Proliferation Colorimetric Assay Kit | 500tests |
| K303-500 | VisionBlue™ Quick Cell Viability Fluorometric Assay Kit | 500tests |
| K302-500 | WST Cell Proliferation Colorimetric Assay Kit plus | 500tests |
| K301-500 | WST-1 Cell Proliferation Colorimetric Assay Kit | 500tests |
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