先导抗体分子发现服务

一、原材料准备

● 药靶蛋白表达

华美生物拥有15年重组蛋白表达经验，可提供从基因合成、载体构建到蛋白表达及纯化的一站式服务。针对药靶蛋白，在原有的五大重组蛋白表达系统（大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞和无细胞蛋白表达系统）的基础上，经过不断探索与优化，华美生物现已推出四大优势药靶蛋白表达平台，分别是病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台、去垢剂技术平台、Nanodisc技术平台和Nanoparticle 表达平台。

病毒样颗粒 (VLPs) 技术平台-跨膜蛋白

• 展示多次跨膜蛋白的天然构象，具有完整生物活性

• 可提高免疫原性，打破机体自身的免疫耐受

• 包膜VLPs中靶抗原丰度高于过表达细胞

• 大小为100-150nm，是噬菌体展示的最佳靶点

• 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI，助力先导抗体发现

Nanodisc技术平台-跨膜蛋白

• 近似于细胞膜环境，展示完整构象，保持生物活性

• 不含去垢剂，适用于对去垢剂有干扰的实验

• 可直接用于噬菌体筛选（提供空nanodisc反筛）

• 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞实验

去垢剂技术平台-跨膜蛋白

• 可全长表达多次跨膜蛋白，不仅仅只限于ECD表位

• 可精确定量，区别于VLPs和Nanodisc平台

• 可应用于免疫/ELISA/SPR/BLI

Nanoparticle 表达平台-小分子量蛋白

• 展示天然构象，具有完整生物活性

• 可增强免疫反应

• 可直接用于噬菌体筛选（提供空的Nanoparticle反筛）

• 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞实验

● 阳性抗体制备

阳性抗体又称药物对照抗体，阳性抗体序列参考优先次序依次为：已上市的抗体药、临床阶段（Ⅰ-Ⅲ）抗体药、临床前阶段的抗体药、FACS抗体。

● 稳转细胞株构建

稳转细胞株是指通过稳定转导持续稳定表达或干扰特定基因表达的细胞系。在抗体开发领域，稳转细胞株可以作为免疫原刺激动物的特异性免疫反应，可针对多跨膜蛋白的靶点。此外，稳转细胞株广泛用于抗体结合和功能筛选实验。华美生物可提供稳转细胞株构建服务，具体服务内容如下：

CELL POOL检测

单克隆筛选

二、抗体制备

● 免疫动物选择

华美生物可提供多种免疫动物以满足不同客户的不同需求。

● 免疫方案制定

多种抗原（小分子量蛋白，ECD，全长抗原，VLP抗原，稳转细胞等）、多种宿主（小鼠，大鼠，兔子，羊驼等）、多种佐剂（弗氏佐剂，快速佐剂）可选；针对细胞和VLP抗原免疫有专门免疫方案，可增强免疫应答，提高抗体效价。

三、抗体筛选

● 杂交瘤单抗技术

华美生物具有十五年丰富杂交瘤单抗开发经验，技术路线成熟，产品质量稳定可靠，高成功率。初步阳性率高达20%-40%左右，流式阳性率达到10%-20%左右，可满足不同类型客户需求。

● 噬菌体展示技术

华美生物拥有多个百亿级别天然噬菌体库，包括羊驼天然库、人源化纳米库、全人源库和鼠源库。库品质高，正确插入率100%，筛选阳性率90%以上，可提供快速筛选服务，最快可2-4周内完成抗体筛选，亲和力可达到nM级别。此外，我司还提供亲和力成熟服务和抗体人源化改造，保证亲和力和亲本在一个数量级。

四、抗体功能检测

针对筛选获取的先导分子抗体，华美生物会根据客户需求进一步做抗体功能检测，包括抗原ELISA、细胞FACS、抗原SPR及抗原binning检测。抗原ELISA和抗原SPR主要检测抗原抗体的结合活性与亲和力，细胞FACS检测抗体与细胞的结合活性，抗原binning检测鉴定筛选的先导抗体分子和阳性抗体识别的抗原表位是否一致 。