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微生物自动鉴定及药敏系统的研究进展

云南路邦伟业科技有限公司2010年7月14日 11:58 点击:3228

一、细菌自动鉴定及药敏系统的发展史

细菌的鉴定是细菌分类的实验过程,长期以来,临床微生物实验室一直沿用100多年前由GramPasteurKochPetri等创造的传统的微生物学鉴定方法。这些传统的鉴定方法不仅过程烦琐,费时费力,且在方法学和结果的判定、解释等方面易发生主观片面而引起的错误,难以进行质量控制。

20世纪60年代以后,微生物学家和工程技术人员密切合作,对微生物的研究采用了物理的、化学的分析方法,发明了许多自动化仪器,并根据细菌不同的生物学性状和代谢产物的差异,逐步发展了微量快速培养基和微量生化反应系统,使原来缓慢、烦琐的手工操作变得快速、简单,并实现了自动化和机械化。微生物鉴定自动化方法,包括(1)临床微生物鉴定系统;(2)气液色谙分析;鉴定厌氧菌和分枝杆菌多用于研究;(3)核酸杂交;多用于研究;(4)化学发光技术;可鉴定一些细菌少数分枝杆菌属和一些真菌。8090年代发展迅速,并广泛用于临床。1985年第一台自动化细菌分析仪器Vitek-AMS进入中国并成功使用。1999年底法国梅里埃公司推出VITEK2系统,从接种物稀释、密度计比较及卡冲填和封卡等步骤均实现了全自动化。目前已有多种微生物自动鉴定及药敏测试系统问世,如VITEK-AutoMicrobicSystem(AMS)PHOENIXTMMicroScanSensititreABBott(MS-2 System)AUTOBACIDXSys-tern等。这地自动化系统具有先进的微机系统,广泛的鉴定功能,适用于临床微生物实验室、卫生防疫和商检系统,主要功能包括细菌鉴定、细菌药物敏感性试验及最低抑菌浓度(MIC)的测定等。其准确性和可靠性均已大大提高。

二、细菌自动鉴定及药敏系统原理及性能比较

1.原理:

临床微生物鉴定系统使细菌鉴定过程规范化和程序化,将细菌对底物的生化类型与已建立数据库类型相比较。测试原理主要是利用物质产生PH值变化,能释放色源或荧光源复合物的酶学反应,四氮唑标记碳水化合物代谢活性的产生,挥发或非挥发酸产生,或可见生长。

鉴定系统反应原理

系统反应

需要生长

分析

阳性结果显示

系统例子

PH基础反应(多为15-24小时)

碳源利用

PH指示剂颜色变化;利用碳源源产生酸,利用氮源产碱

APICrystalVITEKMicroScan

酶谱(多为2-4小时)

微生物已有的酶

当无色复合物被适当酶水解时,色源/荧光源释放引起颜色变化

MicroScanIDSRemel

碳源利用

有机产物

因转移电子至无色四唑氮标记碳源使染料变为紫色

Biolog

挥发的或非挥发的酸检测

细胞脂肪酸

以检测代谢产物为基础的层析技术,与数据库中的资料相比较

MIDL

生长可见检测

不同底物

微生物利用某一底物产生浊度

酵母校菌

2.采有上述原理的各种鉴定系统可鉴定肠杆菌科, 菌。 目前较完善的鉴定系统性能比较。非发酵菌,革兰阳性球菌,革兰阴性球菌,厌氧菌和酵母

自动鉴定系统性能比较

性能

Vitek

AutoSCAN-4

Walk/Away

Senititre

无限

60

polor

系统容量

32/60/120

无限

40/96

92

 

 

无限

数据库中可鉴定菌种数

 

 

 

 

566

480

 

需氧革兰阴性杆菌(GN

116

112

139

147

246

240

78

需氧革兰阳性杆菌

50

49

49

815

厌氧菌

58

54

50

苛氧菌

21

20

 

194

酵母菌

36

40

42



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