抗环瓜氨酸肽与类风湿性关节炎

张淑兰  冯忠军
石家庄市中医院检验科，河北医科大学第三医院

摘 要：抗环瓜按氨酸肽抗体（抗CCP抗体）是类风湿性关节炎（RA）早期诊断的一种较灵敏的标记物，而且对于医分损伤性与非损伤性RA疾病、病情评估及预后判断都有非常重要的意义。本文就抗CCP抗体的生物学特性以及其在临床中的应用作一综述。

    类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病。在全世界大约有1%的人罹患此病。RA能引起关节的疼痛、僵直及肿胀。在发病2年内即可能出现不可逆的骨关节损伤，并可引起多种并发症，如神经系统疾病、心包炎、淋巴腺炎等。因此，及早诊断RA及给予缓解病情的药物治疗，对控制病情非常重要。1998年，国外，首次报道的抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗CCP抗体）的检测，对RA具有较高的敏感性和特异性，是RA新的血清标志物。

1  抗CCP抗体出现的可能

1.1 现行的诊断标准 类风湿性关节炎是一种致畸性疾病，在发病2年后，即可出现关节的实质性损伤。但现行的诊断指标（美国风湿病协会1987年分类诊断标准）主要依靠临床表现、X线以及类风湿因子（RF）的检测。阳性患者常常出现不可逆的关节损伤。加上RF的检测缺乏特异性和敏感性，不仅可在3%～5%正常人群中被检测到，而且在RA患者中阳性率有限。另外，在许多自身免疫性疾病中，都可出现阳性结果。因此，寻找一种特异性和敏感性较高的血清标志物尤为重要。

1.2  RA的一些特异性标志物 抗核周因子（antiperinuclear factor,APF）是定位于口腔黏附膜细胞胞质内的颗粒性蛋白复合物。APF可在RA患者的血清和关节液中测出，与性别、年龄无关。APF可在早期类风湿关节炎出现，出现阳性，往往提示预后欠佳，尤其是RF阴性的APF阳性病人。因此，APF显示了较强的特异性（73%～99%）和敏感性。虽然具有上述许多优势，但一直未能得到推广的原因是：APF以人的口腔黏膜上皮细胞为反应底物，挑选合适的人群较难。而且，用间接免疫荧光法检测，方法精密度较差。另外，还有一些抗体如抗角蛋白抗体、抗Filaggrin抗体等，都是RA患者血清中较理想的标记物。新近认为上述抗体在化学结构上具有相关性，它们的表位都含有瓜氨酸，称为瓜氨酸相关自身免疫系统。此系统在RA的早期诊断及早期治疗中起着关键作用。

2  环瓜氨酸肽的生物学特性

    1998年Schellekens和Girbal Neuhause等根据filaggrin的cDNA序列合成的多肽证实瓜氨酸残基是类风湿关节炎特异的抗中间丝相关蛋白（filaggrin）抗体识别表位的必需组成。通过对基因文库中各个序列号的filggrin氨基酸序列进行分析，合成了一条以瓜氨酸代替精氨酸的20个左右氨基酸残基的肽链。并通过一定的试验显示了瓜氨酸是RA患者血清中抗filaggrin相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。在2000年，Schellekens将一条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的两个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β-转角具有相似结构的二硫键，合成环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）。采用环瓜氨酸肽为抗原基质用ELISA法检测RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体，敏感性和特异性均有明显提高。

3  抗CCP抗体的测定

    应用ELISA法可定性或定量检测患者血清中抗CCP抗体。Jansen AL等通过不同类型的多关节疾病患者血清中抗CCP抗体的测定，预测了抗CCP抗体大于50AU/ml即可对早期类风湿性关节炎有较高的敏感性和特异性。Bizzaro N等检测了RA患者抗CCP抗体的水平，结果也同样显示了抗CCP抗体的临界值为50AU/ml。并且RA患者清血清中抗CCP抗体的平均水平为1100AU/ml*（范围为：57～3419AU/ml。而对照组抗CCP抗体的平均水平仅为6.8AU/ml（范围为：1～39AU/ml）。进一步证实了抗CCP抗体对RA患者的诊断价值。

4  抗CCP抗体在临床上的应用

    虽然抗CCP抗体在RA发病的致病机制尚未阐明，但作为疾病的早期诊断和进展标记显示了较好的前景。抗CCP抗体主要为IgG类抗体，对RA的特异性约为96%，在RA的早期阶段即可出现阳性，并且具有很高的阳性预报道。Mediwake R等对已有关节损伤的SLE和RA患者分别进行了anti-RA33和抗CCP抗体的测定，结果也显示了抗CCP抗体仅在RA中有较高的阳性，可从损伤性关节炎患者中区分出来。另外，有一些报道认为，抗CCP抗体作为RA的灵敏标志物，有能力区分损伤性和非损伤性关节疾病。但Bas S等提出了不同的观点，通过他们的临床试验，认为抗CCP抗体是RA早期诊断的特异性指标，而RF可作为疾病损伤严重性的较好的标记物。因此，联合检测抗CCP抗体和RF对RA的诊断及预后有很大的意义。抗CCP抗体除早期诊断RA外，对疾病的预后评估也有重要意义。在已确诊的RA患者中，抗CCP抗体阳性者较阴性者更易发展为多关节损伤。Kroot EJJA等通过对数百例发病1年以内的RA患者进行了1～6年的随访，通过对疾病活动评分、健康评估问卷以及影像学评分的连续观察，抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏较阴性者严重。

    综上所述，抗CCP抗体在RA中的致病机制虽未阐明，但在RA疾病的早期诊断、区分损伤性与非损伤性RA疾病、在疾病的预后评估等方面都有非常重要的意义。并且其测定的方法（ELISA）简便、准确，是在类风湿性关节炎的检测方法较有希望、值得推广的一种自身抗体检测法。

摘自：《国外医学》2003年第6期