小白：拿到产品后都不知所措了，之前拿到的产品一不小心就选错了溶剂，直接废掉不能用了，扔掉的都是白花花的经费啊。

 师兄：拿到产品不能想当然的就动手，要多查资料查文献。科学研究一切都是要有理有据有出处的，即使没有相关文献也是需要查阅大量相似资料奠定理论基础，设置梯度来摸索的。一切都是不容易的。

 萌 Cece：给药是个大工程，需要大量的理论基础和文献参考，只有站在巨人的肩上，我们才能看的更远，走的更久

不同的产品，不同的给药方式和给药剂量，即使是同一产品，不同的细胞，不同动物模型，给药剂量也是不一样的。拿到产品后，我们要根据产品名字和自己的实验设计，有目的的去查文献。

■ 细胞实验，剂量如何查询

图 1.  细胞实验文献查阅

■ 当小分子抑制剂遇到转染

当然，并不是所有的剂量组都只有小分子化合物，有些伙伴可能会纠结 “我还要给细胞转染，这个时候我要怎么加药呢？” “除了小分子抑制剂，我要加我自己合成的其他药物，该是怎样怎么加药呢？”

如下面这篇文章里，作者团队探究 κ ***受体 (KOR) 在 食管鳞状细胞癌 (ESCC) 中的作用及其潜在机制，研究者前期使用 siRNA 敲低 KOR 表达，发现 KOR 下调增强了 ESCC 细胞的增殖、转移和侵袭能力。激活 PI3K -Akt 通路对肿瘤细胞（经 siRNA 敲低 KOR 表达处理）的增殖有促进作用，为探究 AKT 的激活是否是导致转染 siRNA-KOR 的肿瘤细胞的增殖、入侵和迁移的原因，使用小分子抑制剂 HY-10249A (0.5 μM) 对其进行处理^[1]。

图 2.  细胞实验文献查阅

图 3. AKT 激酶抑制可以逆转 KOR 的抑制对细胞增殖、侵袭和迁移的影响^[1]

 

 

敲黑板: 请注意，这里是案例，实际给药还需多多参考文献！

 关注关注文献中的 Method 部分，搜索关键字以及做好整理。

 搜关键字以及做好整理。常见关键字 Pretreatment，co-treatment, following, before treatment 等等。

 

动物实验的给药方式包括口服，灌胃，注射 (皮下注射，皮内注射，静脉注射，腹腔注射，肌肉注射等)，具体可参考小 M 的往期推文：给药方式犹豫不决？不看你就亏了。

在动物实验给药之前，首先明确自己的实验动物和实验模型，再用关键字查阅文献选择合适的给药方式进行实验设计。如下所示：

在查阅文献的网站搜索框中输入产品名称，动物模型，剂量单位(小分子类产品一般 mg/kg 较多)，搜索文献，搜到文献后参考文献剂量设置梯度进行就可以啦！

还是以 LY294002 为案例，假设你用的小鼠是 BALB/c 小鼠，准备做乳腺癌相关研究，那么你可以关键字可以这样设置！“LY294002 breast tumor  BALB/c mg/kg” 或者 “LY294002 breast cancer BALB/c mg/kg”。

好了，查到大量文献后，请进入阅读学习模式！

图 4. 动物实验文献查阅

■ 溶解界老大哥：万能溶剂 DMSO

很多产品并不溶于水，这时候，我们的万能溶剂 DMSO 就闪亮登场了。

细胞实验可以根据您的最大使用浓度，配置 1000X 的储液，使用时培养基稀释到工作液浓度。

但溶剂的选择，也不能想当然是 DMSO，前切记切记多看说明书。

注：MCE 说明书的溶解方案都是实测数据。有些产品很有可能是万能溶剂也溶解不了，番茄红素为例，它的溶剂是 THF 四氢呋喃。此外，其他有机溶剂 DMF (铂类物质的好朋友)，***等，虽相对 DMSO 使用较少，但它们还是药物溶解的好溶剂！见往期推文：溶剂大比拼—细胞实验篇。

您如果选择 PBS 或生理盐水配置，溶解度参考水中的溶解信息，配置好后 0.22 µm滤膜过滤，直接使用不可储存。因 PBS 或生理盐水的成分相对复杂，长期储存不确定是否会影响产品活性，所以不建议用 PBS 或生理盐水陪住储液。

■ 免疫缺陷鼠，如裸鼠，NGS 小鼠等体弱小鼠，一般建议配置至少 50X 的储液。

可能有小伙伴要问：50X，这是什么意思？此处以Rapamycin (HY-10219) 为例，一般小鼠体内的给药剂量在 1-10 mg/kg。假设给药 8 mg/kg ^[3]，小鼠体重为 20 g，腹腔注射，200 µL 的给药体积。

 

动物实验中，有些模型给药剂量较大，可能无法配置 10X 或者 50X 储备液，那么需要考虑现配现用的方案，比如 0.5% CMC-Na/saline (HY-Y0703），50% PEG 300 (HY-Y0873) +50% saline 等方案可选 (详见往期推文：动物实验溶剂大 Battle！)。